附件：肺炎支原體IgM/IgG抗體檢測試劑注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則（2021年第4號）.doc

肺炎支原體IgM/IgG抗體檢測試劑注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則
（2021年第4號）

本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊申請人對肺炎支原體IgM/IgG抗體檢測試劑注冊申報資料的準(zhǔn)備及撰寫，同時也為技術(shù)審評部門對注冊申報資料的技術(shù)審評提供參考。

本指導(dǎo)原則是對肺炎支原體IgM/IgG抗體檢測試劑的一般要求，申請人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對注冊申報資料的內(nèi)容進行充實和細(xì)化。

本指導(dǎo)原則是對申請人和審查人員的指導(dǎo)性文件，但不包括注冊審批所涉及的行政事項，亦不作為法規(guī)強制執(zhí)行，如果有能夠滿足相關(guān)法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但需要提供詳細(xì)的研究資料和驗證資料，相關(guān)人員應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。

本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)體系以及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定的，隨著法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)的不斷完善，以及科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時進行調(diào)整。

一、適用范圍

肺炎支原體（Mycoplasma pneumoniae，MP）屬于柔膜體綱，支原體屬，是引起兒童和成人呼吸道感染及社區(qū)獲得性肺炎（community-acquired pneumonia，CAP）的常見病原體之一。MP感染廣泛存在于世界各地，平時散在性發(fā)病，每隔數(shù)年會出現(xiàn)地區(qū)周期性流行，每次流行持續(xù)數(shù)月到數(shù)年不等。對于群聚性發(fā)病或初始經(jīng)驗性治療無效的CAP患者，住院或重癥CAP患者，建議進行致病原檢查，明確CAP致病原可有助于進行針對性抗感染治療。

肺炎支原體的檢測對于支原體肺炎的診斷至關(guān)重要，實驗室檢測方法包括病原體培養(yǎng)、抗原檢測、抗體檢測和核酸檢測。肺炎支原體培養(yǎng)難度較大，需采用專門的培養(yǎng)基和培養(yǎng)技術(shù)，耗時長，但特異性高。血清特異性抗體檢測是目前輔助診斷肺炎支原體肺炎的重要手段，免疫層析法、酶聯(lián)免疫法和化學(xué)發(fā)光法抗體檢測試劑在臨床中廣泛應(yīng)用。顆粒凝集（particle agglutination，PA）試驗和補體結(jié)合（complement fixation，CF）試驗是檢測肺炎支原體抗體的傳統(tǒng)方法，但是無法區(qū)分IgM和IgG。

本指導(dǎo)原則適用于采用免疫層析法、酶聯(lián)免疫法或化學(xué)發(fā)光法，體外定性檢測人血清、血漿或全血中的肺炎支原體IgM和/或IgG抗體的試劑。結(jié)合臨床和其他實驗室指標(biāo)，可用于肺炎支原體感染的輔助診斷。對基于其他方法學(xué)的試劑，及肺炎支原體其他抗體或總抗體檢測試劑，可能部分要求不完全適用或本文所述內(nèi)容不夠全面，申請人可以參照本指導(dǎo)原則，根據(jù)產(chǎn)品特性對適用部分進行評價或補充其他的評價資料進行相應(yīng)驗證。

二、注冊申報資料要求

（一）綜述資料

綜述資料主要包括產(chǎn)品預(yù)期用途、產(chǎn)品描述、有關(guān)生物安全性的說明、主要研究結(jié)果的總結(jié)評價以及同類產(chǎn)品上市情況介紹等內(nèi)容。產(chǎn)品描述中應(yīng)說明產(chǎn)品所采用的技術(shù)原理，選擇捕獲法或間接法的考慮。同類產(chǎn)品上市情況介紹部分應(yīng)著重從方法學(xué)、檢測原理、特異性抗原等主要組成成分、樣本類型等方面寫明擬申報產(chǎn)品與目前市場上已獲批準(zhǔn)的同類產(chǎn)品之間的主要區(qū)別。

（二）主要原材料的研究資料

此類產(chǎn)品的主要原材料一般包括抗原、抗體、對照品/質(zhì)控品/校準(zhǔn)品和企業(yè)參考品等。如主要原材料為企業(yè)自制，應(yīng)提供其詳細(xì)的制備、鑒定和質(zhì)量控制過程，其制備工藝必須相對穩(wěn)定;如主要原材料源于外購，應(yīng)提供資料包括：選擇該原材料的依據(jù)及對比篩選試驗資料、選定的供應(yīng)商名稱，供應(yīng)商提供的原材料檢驗報告（質(zhì)量證書），以及該原材料到貨后的入廠檢驗報告，供應(yīng)商為原材料的生產(chǎn)商，不得隨意更換。申請人應(yīng)對各主要原材料均明確質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。

1.肺炎支原體抗原

肺炎支原體抗原決定了檢測的敏感度和特異性，對抗體檢測試劑至關(guān)重要。應(yīng)注重抗原的選擇，詳細(xì)描述抗原的名稱，天然/重組表達信息及選擇該抗原的依據(jù)。提交抗原來源、制備、純化、鑒定及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（外觀、蛋白濃度、純度、分子量、功能性試驗等）等詳細(xì)試驗資料。

2.抗人IgM/IgG單克隆抗體

詳述抗體的選擇過程，提交抗體生物學(xué)來源、免疫原及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（外觀、蛋白濃度、純度、分子量、效價、功能性試驗等）等詳細(xì)試驗資料。

3.質(zhì)控線/對照品/質(zhì)控品/校準(zhǔn)品

免疫層析方法學(xué)的產(chǎn)品應(yīng)設(shè)置質(zhì)控線，詳述質(zhì)控線相關(guān)原材料（例如羊抗鼠IgG多克隆抗體）的選擇依據(jù)和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

對照品/質(zhì)控品應(yīng)至少包含陰性和陽性兩個水平。陽性對照品/質(zhì)控品/校準(zhǔn)品可選擇經(jīng)合理稀釋的臨床陽性樣本或人源化抗體，陰性對照品/質(zhì)控品/校準(zhǔn)品可選擇臨床陰性樣本或陰性基質(zhì)等。提交相關(guān)原料的來源、選擇和陰、陽性確認(rèn)等相關(guān)研究資料。企業(yè)應(yīng)對對照品/質(zhì)控品的檢測結(jié)果做出明確的范圍要求（試驗有效性的判斷）。

4.其他主要原輔料

除上述主要原材料外，產(chǎn)品中包含的其他主要原輔料，如膠體金、辣根過氧化物酶、吖啶酯、硝酸纖維素膜、微孔板、磁微粒、樣本稀釋液等，均應(yīng)進行驗證，并提交相關(guān)資料。明確主要原輔料的供應(yīng)商和質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。免疫層析方法學(xué)的產(chǎn)品如適用于全血，應(yīng)介紹血細(xì)胞去除方式及相關(guān)原材料，并驗證去除效果。

5.企業(yè)參考品

企業(yè)參考品是保證產(chǎn)品性能穩(wěn)定的重要構(gòu)成之一。應(yīng)提交企業(yè)參考品的原料來源、選擇、制備、陰陽性及濃度/滴度確認(rèn)方法或試劑等相關(guān)驗證資料。企業(yè)參考品的基質(zhì)應(yīng)與待測樣本相同。企業(yè)參考品的設(shè)置應(yīng)至少包括：陽性參考品、陰性參考品、檢測限參考品和重復(fù)性參考品。其中陽性參考品重在評估產(chǎn)品的包容性，應(yīng)選擇不同來源的臨床樣本，并設(shè)置不同滴度水平。陰性參考品應(yīng)可評價產(chǎn)品的特異性，建議包括含有類風(fēng)濕因子、其他病原體抗體等可能的干擾和交叉樣本，對于檢測肺炎支原體IgM抗體的試劑，陰性參考品中建議包括肺炎支原體IgG抗體陽性樣本。檢測限參考品可設(shè)置臨床陽性樣本的系列稀釋樣本，其中應(yīng)包含最低檢測限水平。重復(fù)性參考品可設(shè)置至少兩個水平的臨床陽性樣本,包括最低檢測限附近濃度。對于同時檢測肺炎支原體IgM和IgG抗體的試劑，企業(yè)參考品需對IgM抗體和IgG抗體分別設(shè)置。

（三）主要生產(chǎn)工藝及反應(yīng)體系的研究資料

1.產(chǎn)品基本反應(yīng)原理介紹。

2.主要生產(chǎn)工藝介紹，可用流程圖方式表示，并簡要說明主要生產(chǎn)工藝的確定依據(jù)。

3.包被/標(biāo)記工藝研究，申請人應(yīng)考慮如包被/標(biāo)記液量、濃度、時間、條件等指標(biāo)對產(chǎn)品性能的影響，通過實驗確定上述指標(biāo)的最佳組合。

4.顯色系統(tǒng)、酶作用底物等的介紹以及最適條件研究。

5.反應(yīng)條件確定：申請人應(yīng)考慮反應(yīng)時間、判讀時間、反應(yīng)溫度、洗滌液體積和洗滌次數(shù)（如涉及）等條件對產(chǎn)品性能的影響，通過實驗確定上述條件的最佳組合。

6.反應(yīng)體系中樣品加樣方式及加樣量確定：通過實驗確定最佳的加樣方式及加樣量。如樣本需采取稀釋或其他必要的方法進行處理后方可用于最終檢測，申請人還應(yīng)對樣本稀釋液及其用量、其他必要的處理方法等進行研究。對于IgM抗體檢測試劑，如采用間接法，建議考慮高濃度特異性IgG對結(jié)果的影響，合理設(shè)置IgG去除相關(guān)樣本處理步驟（例如采用含有IgG吸附劑的樣本稀釋液等），或者詳述產(chǎn)品設(shè)計中關(guān)于避免IgG影響IgM檢測結(jié)果的合理措施，盡量減少特異性IgG對IgM檢測造成的假陰性和假陽性。

（四）分析性能評估資料

申請人應(yīng)提交在符合質(zhì)量管理體系的生產(chǎn)環(huán)境下生產(chǎn)的試劑進行的所有性能評估資料，包括具體研究方法、實驗方案、實驗數(shù)據(jù)、統(tǒng)計分析等詳細(xì)資料。有關(guān)分析性能評估的背景信息也應(yīng)在申報資料中進行描述，包括實驗地點，采用的試劑名稱、規(guī)格和批號，儀器名稱和型號，樣本類型和來源等。分析性能評估的實驗方法可以參考國際或國內(nèi)有關(guān)體外診斷試劑性能評估的指導(dǎo)原則進行，建議著重對以下分析性能進行研究。肺炎支原體IgM和IgG抗體的性能應(yīng)分別研究。

1.企業(yè)參考品檢驗

根據(jù)主要原材料研究資料中的企業(yè)參考品設(shè)置情況，采用三批產(chǎn)品對企業(yè)參考品進行檢驗并提供詳細(xì)的實驗數(shù)據(jù)。

2.最低檢測限

建議采用已明確肺炎支原體抗體滴度的臨床陽性樣本，采用陰性樣本進行系列稀釋，進行最低檢測限的建立和驗證。應(yīng)采用合理方法確認(rèn)抗體類型和滴度，提供詳細(xì)的確認(rèn)方法及結(jié)果。

2.1選取至少3份臨床樣本，系列稀釋獲得多個濃度梯度，每個濃度重復(fù)檢測不少于3次，以100%可檢出的最低濃度水平作為預(yù)設(shè)檢測限。在此濃度附近制備若干濃度梯度樣品，每個濃度至少重復(fù)檢測20次，將具有95%陽性檢出率的最低濃度作為最低檢測限。

2.2選擇與2.1不同的3份臨床樣本，采用陰性基質(zhì)稀釋到最低檢測限濃度水平進行驗證，應(yīng)達到95%陽性檢出率。

3.包容性

應(yīng)選擇中國境內(nèi)來源于不同時間、不同地域的多份臨床確診且經(jīng)合理方法確定肺炎支原體抗體陽性的患者樣本進行檢測，建議覆蓋Ⅰ型和Ⅱ型兩個基因型，檢測結(jié)果應(yīng)與預(yù)期結(jié)果相符。驗證用樣本的抗體水平應(yīng)接近檢測限濃度，可采用臨床陰性樣本進行稀釋。

4.精密度

申請人應(yīng)對精密度指標(biāo)的評價標(biāo)準(zhǔn)做出合理要求，如變異系數(shù)的范圍或顯色強度等。應(yīng)對可能影響檢測精密度的主要變量進行驗證，包括不同時間、地點、操作者、檢測輪次、試劑批次、適用儀器（如適用）等。

設(shè)定合理的精密度評價周期，例如：為期至少20天的檢測。至少采用3個水平的臨床樣本進行精密度評價，具體要求如下：

4.1 陰性樣本：待測物濃度低于最低檢測限或為零濃度，陰性檢出率應(yīng)為100%（n≥20）。

4.2臨界陽性樣本：待測物濃度略高于試劑的最低檢測限，陽性檢出率應(yīng)大于95%（n≥20）。

4.3中/強陽性樣本：待測物濃度呈中度到強陽性，陽性檢出率為100%，變異系數(shù)（CV）應(yīng)在合理的可接受范圍內(nèi)（如適用）（n≥20）。

5.分析特異性

5.1交叉反應(yīng)

應(yīng)對肺炎支原體的近緣微生物抗體，易引起相同或相似的臨床癥狀，及易合并感染的微生物抗體（表1）進行交叉反應(yīng)驗證。同時進行高濃度肺炎支原體特異性IgG抗體和IgM抗體之間的交叉反應(yīng)驗證。

如果試劑原料采用基因重組抗原，則還需考慮對重組基因?qū)胛⑸锾禺愋钥贵w的交叉反應(yīng)評價。例如采用大腸埃希菌作為宿主菌進行重組抗原的表達，建議考慮大腸埃希菌抗體陽性樣本可能產(chǎn)生的交叉反應(yīng)。

交叉反應(yīng)用臨床樣本中相關(guān)病原體抗體滴度水平應(yīng)較高，并且抗體類型（IgM、IgG）應(yīng)與申報試劑檢測抗體類型一致。提供所有用于交叉反應(yīng)驗證的樣本來源、陰陽性和滴度確認(rèn)等信息。

注：＊項為選擇性驗證

5.2干擾試驗

應(yīng)根據(jù)所采集樣本類型，選擇適用的干擾物質(zhì)進行研究。建議申請人在每種干擾物質(zhì)的潛在最大濃度（“最差條件”）下，采用待測抗體為弱陽性和陰性水平的多例樣本進行試驗，應(yīng)至少包括下列可能的干擾物質(zhì)。

5.2.1 內(nèi)源性干擾物質(zhì)：血紅蛋白、膽紅素、血脂、類風(fēng)濕因子、其他自身免疫性抗體，異嗜性抗體（如HAMA）、總IgG、總IgM、紅細(xì)胞壓積（全血樣本適用），高濃度肺炎支原體特異性IgG抗體與特異性IgM抗體的干擾。

5.2.2常見治療性藥物：左氧氟沙星、莫西沙星、吉米沙星等喹諾酮類抗菌藥物，阿奇霉素、克拉霉素、紅霉素等大環(huán)內(nèi)酯類抗菌藥物，多西環(huán)素、米諾環(huán)素等四環(huán)素類抗菌藥物。

5.2.3 癥狀相關(guān)其他經(jīng)驗性藥物。

5.2.4抗凝劑：如果試劑盒適用樣本類型包括血漿、全血樣本，可采用一定數(shù)量同源樣本通過比對試驗的方法，驗證各種抗凝劑的適用性。

6. IgM抗體破壞試驗

對于肺炎支原體IgM抗體檢測試劑，建議對至少5份含有肺炎支原體特異性IgM抗體的樣本進行IgM破壞實驗研究，方法為采用特定的化學(xué)制劑（如2－巰基乙醇或二硫蘇糖醇）處理樣本后，重新進行檢測，IgM檢測結(jié)果應(yīng)為陰性。

7.鉤狀（HOOK）效應(yīng)研究

須采用多份高滴度樣本進行梯度稀釋后由低濃度至高濃度分別檢測，每個梯度的稀釋液重復(fù)3～5次，對鉤狀效應(yīng)進行合理的驗證。

8.其他需注意問題

對于使用儀器進行結(jié)果判讀的產(chǎn)品，應(yīng)提供產(chǎn)品說明書【適用機型】項中所有型號儀器的性能評估資料。

9.適用的樣本類型

如產(chǎn)品適用于血清和血漿，可采用同源比對驗證樣本的可比性。如產(chǎn)品適用于靜脈全血，建議進行最低檢測限和精密度研究，同時進行同源比對試驗。

（五）陽性判斷值確定資料

提交對申報試劑陰性/陽性結(jié)果判斷的陽性判斷值（cut-off）確定資料，包括具體的試驗方案、人群及樣本選擇、評價標(biāo)準(zhǔn)、統(tǒng)計學(xué)分析和研究數(shù)據(jù)等。建立陽性判斷值的樣本選擇應(yīng)考慮不同的地理區(qū)域、不同的感染階段和生理狀態(tài)等因素的影響，納入陰性、陽性及臨界值附近的樣本。肺炎支原體IgM抗體陽性樣本，可采用急性期且顆粒凝集試驗滴度1：160的樣本，或采用其他合理方法確定。如檢測結(jié)果為數(shù)值形式，建議采用受試者工作特征曲線（receiver operating characteristic curve，ROC）的分析方式來確定合理的陽性判斷值；如試驗結(jié)果存在灰區(qū)（equivocal zone），應(yīng)明確灰區(qū)建立的基礎(chǔ)。

如產(chǎn)品適用多個樣本類型，應(yīng)明確不同的樣本類型是否存在差異，如無差異，可采用一個樣本類型進行陽性判斷值確定后，對其他樣本類型進行驗證。如有差異，應(yīng)分別進行陽性判斷值的確定。

（六）穩(wěn)定性研究資料

穩(wěn)定性研究資料主要涉及兩部分內(nèi)容，申報試劑的穩(wěn)定性和適用樣本的穩(wěn)定性研究。

1.申報試劑的穩(wěn)定性主要包括實時穩(wěn)定性（有效期）、開瓶（開封）穩(wěn)定性、凍融穩(wěn)定性（如涉及）、機載穩(wěn)定性（如涉及）、運輸穩(wěn)定性等研究。如果產(chǎn)品配套校準(zhǔn)品，還應(yīng)對校準(zhǔn)頻率進行研究。申請人可根據(jù)實際需要選擇合理的穩(wěn)定性研究方案。穩(wěn)定性研究資料應(yīng)包括研究方法的確定依據(jù)、具體的實施方案、詳細(xì)的研究數(shù)據(jù)以及結(jié)論。對于實時穩(wěn)定性研究，應(yīng)提供至少三批樣品在實際儲存條件下保存至成品有效期后的研究資料。

2.適用樣本的穩(wěn)定性

樣本穩(wěn)定性一般包括樣本各種實際運輸及儲存（常溫、冷藏和冷凍）條件下的保存期限驗證，以確認(rèn)樣本的保存條件及保存時間?？梢栽诤侠淼臏囟确秶鷥?nèi)，每間隔一定的時間段即對儲存樣本進行驗證，從而確認(rèn)不同類型樣本的穩(wěn)定性?？衫鋬霰４娴臉颖具€應(yīng)對凍融次數(shù)進行合理驗證。

（七）臨床評價資料

開展臨床試驗應(yīng)滿足《體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導(dǎo)原則》（原國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第16號）的要求，如相關(guān)法規(guī)、文件有更新，臨床試驗應(yīng)符合更新后的要求。下面僅說明該類產(chǎn)品臨床試驗中應(yīng)關(guān)注的重點問題。

1.臨床試驗機構(gòu)及人員

申請人應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品特點及預(yù)期用途，選擇不少于3家（含3家）已備案且具備該產(chǎn)品臨床試驗?zāi)芰Φ呐R床機構(gòu)開展臨床試驗。

2.臨床試驗適用人群

申請人應(yīng)選擇體征/癥狀符合呼吸道感染的目標(biāo)人群，臨床試驗的受試人群應(yīng)盡可能全面地代表預(yù)期人群。臨床上，學(xué)齡前、學(xué)齡兒童及青少年為肺炎支原體的易感人群，在進行臨床試驗時應(yīng)注意入組受試者代表性。建議受試者中易感人群比例不低于50%，且受試者年齡分布應(yīng)均衡。

3.臨床試驗方法

臨床試驗采用試驗用體外診斷試劑與已上市同類產(chǎn)品（對比試劑）進行比較研究的方法，評價兩種方法檢測結(jié)果的一致性，評價指標(biāo)通常包括陽性符合率、陰性符合率等。對比試劑在預(yù)期用途、適用人群、樣本類型、檢測方法學(xué)、檢測性能等方面應(yīng)與試驗用體外診斷試劑具有較好的可比性。考慮到試驗用體外診斷試劑的預(yù)期用途，臨床試驗中陽性和陰性樣本均應(yīng)包括一定量的新鮮樣本。

體外診斷試劑的比較研究試驗中應(yīng)對受試者樣本設(shè)盲，并使檢測順序隨機，以避免因操作者和檢測結(jié)果的評價者知曉受試者的疾病診斷或?qū)Ρ仍噭z測結(jié)果等信息而引入偏倚。對于結(jié)果不一致的樣本建議通過合理的方式進行分析，分析方式包括不一致樣本的第三方試劑復(fù)測、與金標(biāo)準(zhǔn)的一致性研究等。

對于肺炎支原體特異性IgM檢測試劑，申請人還應(yīng)對急性期患者樣本進行試驗用體外診斷試劑與急性期確認(rèn)參考方法的一致性研究，以評價試驗用體外診斷試劑的臨床靈敏度。選擇不少于30例處于感染急性期患者的樣本。急性期確認(rèn)參考方法一般包括：肺炎支原體特異性IgG抗體的血清學(xué)轉(zhuǎn)換（動態(tài)監(jiān)測2份或以上的血清IgG，恢復(fù)期與急性期比較IgG呈4倍以上升高），呼吸道樣本（咽拭子、痰液等）核酸檢測或分離培養(yǎng)等。

4.樣本類型

肺炎支原體抗體檢測試劑的樣本類型通常涉及血清、血漿及全血。臨床試驗時應(yīng)以其中一種樣本類型為主進行臨床試驗。其他樣本類型可通過同源樣本一致性比對方式進行樣本類型適用性臨床驗證。如血清與血漿樣本之間經(jīng)臨床前研究階段驗證不存在性能差異，可以在各具有一定數(shù)量的前提下，通過合并統(tǒng)計的方式證明兩種樣本類型的適用性。

臨床樣本的采集、處理、保存等應(yīng)分別滿足臨床試驗中所涉及各產(chǎn)品說明書相關(guān)要求。

5.樣本量

建議采用單組目標(biāo)值法估算臨床試驗的最低樣本量，通過陽性符合率計算所需陽性樣本的例數(shù)，通過陰性符合率計算所需陰性樣本的例數(shù)，同時考慮脫落情況，估算最低樣本總量。試驗用體外診斷試劑所能達到的陽性符合率和陰性符合率預(yù)期值建議經(jīng)過小規(guī)模預(yù)試驗獲得。根據(jù)現(xiàn)有認(rèn)知，建議陽性符合率目標(biāo)值設(shè)定不低于90%，陰性符合率目標(biāo)值設(shè)定不低于95%。當(dāng)符合率預(yù)期值遠(yuǎn)高于目標(biāo)值時，應(yīng)采用其他的方法進行樣本量的估算。

6.臨床試驗方案

各臨床試驗機構(gòu)的方案應(yīng)一致，且保證在整個臨床試驗過程中遵循預(yù)定的方案，不可隨意改動。

試驗方案應(yīng)確定嚴(yán)格的入選/排除標(biāo)準(zhǔn)，任何已入選的樣本被排除出臨床試驗都應(yīng)記錄在案并明確說明原因。同時，所制定的臨床試驗方案應(yīng)符合所涉及各產(chǎn)品說明書的要求。

7.統(tǒng)計學(xué)分析

應(yīng)對臨床試驗入組情況及數(shù)據(jù)結(jié)果進行詳細(xì)的描述及統(tǒng)計，建議對不同年齡段人群入組情況進行說明。

選擇2×2列聯(lián)表的形式展示兩種試劑的定性檢測結(jié)果。計算陰性符合率、陽性符合率、總符合率及相應(yīng)的95%置信區(qū)間，同時需進行Kappa一致性檢驗。

8.臨床試驗報告

應(yīng)對試驗的整體設(shè)計及各個關(guān)鍵點給予清晰、完整的闡述，應(yīng)該對整個臨床試驗設(shè)計、實施過程、結(jié)果分析、結(jié)論等進行條理分明的描述，并應(yīng)包括必要的數(shù)據(jù)和統(tǒng)計分析方法、必要的討論。

（八）產(chǎn)品技術(shù)要求

申請人應(yīng)當(dāng)在原材料質(zhì)量和生產(chǎn)工藝穩(wěn)定的前提下，根據(jù)產(chǎn)品研制、前期評價等結(jié)果，依據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)及有關(guān)文獻資料，按照《醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則》（原國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第9號）的有關(guān)要求，編寫產(chǎn)品技術(shù)要求。

肺炎支原體IgM/IgG抗體檢測試劑的產(chǎn)品性能指標(biāo)應(yīng)主要包括：物理性狀、陽性參考品符合率、陰性參考品符合率、重復(fù)性、最低檢測限等。

按照《體外診斷試劑注冊管理辦法》（原國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第5號，下文簡稱《辦法》）的規(guī)定，此類產(chǎn)品為第三類體外診斷試劑，申請人應(yīng)按照《醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則》的要求，以附錄形式明確主要原材料、生產(chǎn)工藝及半成品要求，附錄的編制應(yīng)符合相關(guān)編寫規(guī)范的要求。

（九）產(chǎn)品說明書

產(chǎn)品說明書是體外診斷試劑注冊申報最重要的文件之一。產(chǎn)品說明書的格式應(yīng)符合《體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則》（原國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第17號）的要求，進口體外診斷試劑的中文說明書除格式要求外，其內(nèi)容應(yīng)盡量保持與原文說明書的一致性，翻譯力求準(zhǔn)確且符合中文表達習(xí)慣。產(chǎn)品說明書中相關(guān)技術(shù)內(nèi)容均應(yīng)與申請人提交的注冊申報資料中的相關(guān)研究結(jié)果保持一致，如某些內(nèi)容引用自參考文獻，則應(yīng)以規(guī)范格式對此內(nèi)容進行標(biāo)注，并單獨列明文獻的相關(guān)信息。

結(jié)合《體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則》的要求，肺炎支原體IgM/IgG抗體檢測試劑說明書編寫應(yīng)重點關(guān)注以下內(nèi)容。

1．【預(yù)期用途】

1.1該產(chǎn)品用于體外定性檢測人血清/血漿/全血樣本中的肺炎支原體IgM/IgG抗體。

1.2結(jié)合臨床和其他實驗室指標(biāo)，用于肺炎支原體感染的輔助診斷。

1.3臨床背景描述：簡單介紹病原體的生物學(xué)特征、流行病學(xué)、潛伏期、易感人群、感染后的臨床表現(xiàn)及相關(guān)疾病等。簡要介紹現(xiàn)有的肺炎支原體臨床或?qū)嶒炇以\斷方法。

2.【樣本要求】重點明確以下內(nèi)容：

2.1樣本采集：明確采集時間、采集順序、采集量等，是否受臨床癥狀、用藥情況等因素的影響。說明采集方法及樣本類型，對于血漿、全血樣本，應(yīng)注明對抗凝劑的要求。

2.2干擾物的影響：明確常見干擾物對實驗結(jié)果是否產(chǎn)生影響，明確可接受的最大干擾物濃度。

2.3樣本處理及保存：樣本處理方法、保存條件（如冷藏、冷凍等）及不同保存條件下的保存時限和運輸條件等。冷藏、冷凍樣本檢測前是否需要恢復(fù)室溫，冷凍樣本的凍融次數(shù)限制等。

3.【檢驗方法】

詳細(xì)說明試驗操作的各個步驟：

3.1實驗環(huán)境：實驗室的溫度、濕度要求，檢測試劑及樣本的復(fù)溫要求等。

3.2試劑配制方法，試劑開封后使用方法等。

3.3高濃度樣本稀釋的方法。

3.4試驗條件：操作步驟、溫度、時間、儀器波長等。

3.5質(zhì)量控制：操作步驟，質(zhì)控結(jié)果的要求（試驗有效性的判斷），質(zhì)控結(jié)果不符合要求的處理方式。

3.6對于膠體金法檢測試劑可以圖示形式顯示正確的檢驗操作方法、程序等。特別注意應(yīng)強調(diào)操作溫度及濕度條件、讀取結(jié)果的時間。

3.7特別說明檢驗操作過程中的注意事項。

4.【陽性判斷值】說明陽性判斷值，并簡要說明陽性判斷值確定的試驗方法。如陽性判斷值（CO值）需進行計算確定，詳細(xì)描述具體計算方法。

5.【檢驗結(jié)果的解釋】

結(jié)合質(zhì)控線/對照品/質(zhì)控品/校準(zhǔn)品以及樣本的檢測結(jié)果，對所有可能出現(xiàn)的結(jié)果組合及相應(yīng)的解釋進行詳述。對于膠體金法檢測試劑可采用圖示形式顯示檢測結(jié)果。檢驗結(jié)果的解釋應(yīng)以陽性判斷值的研究結(jié)論為依據(jù)。如有適用的臨床診療指南，則應(yīng)在此項下引用，相應(yīng)檢驗結(jié)果的解釋應(yīng)符合相關(guān)指南的要求。如有灰區(qū)判定，詳細(xì)說明灰區(qū)樣本的處理方法。

6.【檢驗方法局限性】

綜合產(chǎn)品的預(yù)期用途、臨床背景、檢測方法及適用范圍等信息，對可能出現(xiàn)的局限性進行相關(guān)說明，建議包括以下內(nèi)容：

6.1 本試劑盒的檢測結(jié)果不得作為臨床診治的唯一依據(jù)，對患者的臨床管理應(yīng)結(jié)合其癥狀/體征、病史、其他實驗室檢查及治療反應(yīng)等情況綜合考慮。

6.2不合理的樣本采集、轉(zhuǎn)運、處理及不當(dāng)?shù)膶嶒灢僮骱蛯嶒灜h(huán)境均有可能導(dǎo)致假陰性或假陽性結(jié)果。

6.3感染初期，抗體可能未產(chǎn)生或者產(chǎn)生水平低于產(chǎn)品最低檢測限，而產(chǎn)生陰性結(jié)果。檢測陰性不能排除急性感染，對于可疑的樣本建議進行病原學(xué)檢測，或至少間隔7天再次檢測。

6.4評價血清學(xué)檢測結(jié)果時需要結(jié)合患者的臨床病程、基礎(chǔ)狀況以及年齡等因素綜合考慮，如：免疫功能低下、缺陷的人群、產(chǎn)生抗體能力較低的嬰幼兒，可能不產(chǎn)生或產(chǎn)生低滴度的抗體，其血清學(xué)抗體檢測的參考價值有限。

6.5在近幾個月內(nèi)接受過輸血或其他血液制品治療的人群，對其陽性檢測結(jié)果的分析應(yīng)慎重。

6.6肺炎支原體IgG抗體在部分治愈患者體內(nèi)持續(xù)存在，短期內(nèi)再次感染的患者確診應(yīng)進行肺炎支原體的抗體滴度動態(tài)檢測或核酸定量檢測以進行佐證。

7.【產(chǎn)品性能指標(biāo)】

詳述以下性能指標(biāo)：企業(yè)參考品符合率、最低檢測限、包容性、精密度、分析特異性（交叉反應(yīng)和干擾試驗）、鉤狀（HOOK）效應(yīng)。介紹所用樣本背景信息、數(shù)量、濃度，評價方法及檢測結(jié)果。

8.【注意事項】

應(yīng)至少包括以下內(nèi)容：

8.1有關(guān)試劑盒內(nèi)人源組分（如有）生物安全性的警告。如：試劑盒內(nèi)對照品（質(zhì)控品）或其他可能含有人源物質(zhì)的組分，雖已經(jīng)通過了乙型肝炎病毒表面抗原（HBs-Ag）、人類免疫缺陷病毒1/2型抗體（HIV1/2-Ab）、丙型肝炎病毒抗體（HCV-Ab）等項目的檢測，結(jié)果為陰性，但截至目前，沒有任何一項檢測可以確保絕對安全，故仍應(yīng)將這些組分作為潛在傳染源對待。

8.2有關(guān)實驗操作、樣本保存及處理等其他注意事項。

三、參考文獻

1.《體外診斷試劑注冊管理辦法》（原國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第5號），2014年7月30日

2.《體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導(dǎo)原則》（原國家食品藥品監(jiān)督管理總局公告2014年第16號），2014年9月11日.

3.《體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則》（原國家食品藥品監(jiān)督管理總局公告2014年第17號），2014年9月11日

4.《國家食品藥品監(jiān)督管理總局關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告》（原國家食品藥品監(jiān)管總局公告2014年第44號），2014年9月5日

5.中華醫(yī)學(xué)會兒科學(xué)分會臨床檢驗學(xué)組，兒童肺炎支原體呼吸道感染實驗室診斷中國專家共識，中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2019年7月第42卷第7期

6.中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)分會，中國成人社區(qū)獲得性肺炎診斷和治療指南（2016年版），中華結(jié)核和呼吸雜志，2016年4月第39卷第4期

7.陸權(quán)，陸敏. 肺炎支原體感染的流行病學(xué)[J]. 中華兒科雜志，2016，54（3）:196-197

8.中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)分會感染學(xué)組，成人肺炎支原體肺炎診治專家共識，中華結(jié)核和呼吸雜志，2010年9月第33卷第9期

四、起草單位

國家藥品監(jiān)督管理局醫(yī)療器械技術(shù)審評中心。