附件：白蛋白測定試劑（盒）注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則（2016年第29號）.doc

白蛋白測定試劑（盒）注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則

本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊申請人對白蛋白測定試劑（盒）注冊申報資料的準(zhǔn)備及撰寫，同時也為技術(shù)審評部門審評注冊申報資料提供參考。

本指導(dǎo)原則是對白蛋白測定試劑（盒）的一般要求，申請人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對注冊申報資料的內(nèi)容進行充實和細(xì)化。

本指導(dǎo)原則是供申請人和審查人員使用的指導(dǎo)文件，不涉及注冊審批等行政事項，亦不作為法規(guī)強制執(zhí)行，如有能夠滿足法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但應(yīng)提供詳細(xì)的研究資料和驗證資料。應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。

本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定的，隨著法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系的不斷完善和科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時進行調(diào)整。

一、適用范圍

依據(jù)《體外診斷試劑注冊管理辦法》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第5號）和《食品藥品監(jiān)管總局關(guān)于印發(fā)體外診斷試劑分類子目錄的通知》（食藥監(jiān)械管〔2013〕242號），本指導(dǎo)原則適用于按Ⅱ類醫(yī)療器械管理的白蛋白檢測試劑（盒），產(chǎn)品類別為：Ⅱ-1用于蛋白質(zhì)檢測的試劑。

白蛋白測定試劑（盒）適用于使用溴甲酚綠法（BCG）、溴甲酚紫法（BCP）對血清、血漿中白蛋白進行定量檢測的白蛋白測定試劑（盒），包括手工試劑和在半自動、全自動生化分析儀上使用的試劑。

本指導(dǎo)原則不適用于干化學(xué)方法測定白蛋白試劑（盒）。

二、注冊申報資料要求

（一）綜述資料

白蛋白是屬于球蛋白的一種蛋白質(zhì)。廣泛分布在各種動植物中，在人體血液，組織液中含有白蛋白，它最重要的作用是維持膠體滲透壓。白蛋白的分子結(jié)構(gòu)含585個氨基酸殘基的單鏈多肽，分子量為66458，分子中含17個二硫鍵，不含有糖的組分。在體液pH7.4的環(huán)境中，白蛋白為負(fù)離子，每分子可以帶有200個以上負(fù)電荷。它是血漿中很重要的載體，許多水溶性差的物質(zhì)可以通過與白蛋白的結(jié)合而被運輸。白蛋白（又稱清蛋白，albumin,Alb）是由肝實質(zhì)細(xì)胞合成，在血漿中的半壽期約為15—19天，是血漿中含量最多的蛋白質(zhì)，占血漿總蛋白的40%—60%。其合成率雖然受食物中蛋白質(zhì)含量的影響，但主要受血漿中白蛋白水平調(diào)節(jié)，在肝細(xì)胞中沒有儲存，在所有細(xì)胞外液中都含有微量的白蛋白。白蛋白是血漿中含量最多、分子最小、溶解度大、功能較多的一種蛋白質(zhì)。白蛋白增高主要見于血液濃縮而致相對性增高，如嚴(yán)重脫水和休克、嚴(yán)重?zé)齻?、急性出血、慢性腎上腺皮質(zhì)功能減低癥。白蛋白降低常見于肝硬化合并腹水及其他肝功能嚴(yán)重?fù)p害(如急性肝壞死、中毒性肝炎等)營養(yǎng)不良、慢性消耗性疾病、糖尿病、嚴(yán)重出血腎病綜合征等。

綜述資料主要包括產(chǎn)品預(yù)期用途、產(chǎn)品描述、有關(guān)生物安全性的說明、研究結(jié)果的總結(jié)評價以及同類產(chǎn)品上市情況介紹等內(nèi)容，其中同類產(chǎn)品上市情況介紹部分應(yīng)著重從方法學(xué)、臨床應(yīng)用情況、性能指標(biāo)等方面寫明擬申報產(chǎn)品與目前市場上已獲批準(zhǔn)的同類產(chǎn)品之間的異同。應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊管理辦法》和《關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局公告2014年第44號）的相關(guān)要求。

（二）主要原材料研究資料（如需提供）

1.試劑盒所用與白蛋白結(jié)合的染料（如溴甲酚綠或溴甲酚紫）詳細(xì)試驗資料。如外觀、純度或試劑等級，供應(yīng)商信息和資質(zhì)，采購合同、原輔料性能指標(biāo)及合格證（檢驗證書）等。

2.企業(yè)內(nèi)部參考品（白蛋白標(biāo)準(zhǔn)液）的原料選擇、制備、定值過程及試驗資料；白蛋白標(biāo)準(zhǔn)液的溯源性文件，包括具體溯源鏈、實驗方法、數(shù)據(jù)及統(tǒng)計分析等詳細(xì)資料。白蛋白已具備有證參考物質(zhì)（如CRM470、ERM/IFCC），生產(chǎn)企業(yè)內(nèi)部白蛋白標(biāo)準(zhǔn)品（液）應(yīng)通過建立自己的參考品體系并溯源。

（三）主要生產(chǎn)工藝及反應(yīng)體系的研究資料（如需提供）

1.主要生產(chǎn)工藝介紹，可以流程圖方式表示，并簡要說明主要生產(chǎn)工藝的確定依據(jù)。

2.產(chǎn)品反應(yīng)原理介紹。

3.檢測體系反應(yīng)條件確定：申請人應(yīng)考慮反應(yīng)時間、反應(yīng)溫度、實驗參數(shù)、儀器型號等條件對產(chǎn)品性能的影響，通過試驗確定上述條件的最佳組合。

4.檢測體系中樣品加樣方式及加樣量確定：申請人應(yīng)考慮樣品加樣方式、加樣量對產(chǎn)品檢測結(jié)果的影響，通過實驗確定最佳的加樣方式及加樣量。如樣本需采取稀釋或其他必要的方法進行處理后方可用于最終檢測，申請人還應(yīng)對可用于樣本稀釋的物質(zhì)或處理方法進行研究，通過試驗確定最終選擇的用于樣本稀釋的物質(zhì)或處理方法。

5.不同適用機型的反應(yīng)條件如果有差異應(yīng)分別詳述。

（四）分析性能評估資料

企業(yè)應(yīng)提交制造商在產(chǎn)品研制階段對試劑盒進行的所有性能驗證的研究資料，包括具體研究方法、實驗數(shù)據(jù)、質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)、統(tǒng)計分析等詳細(xì)資料。對于白蛋白測定試劑（盒）建議選擇多批產(chǎn)品對以下分析性能進行研究：分析靈敏度、線性范圍、精密度、準(zhǔn)確度等指標(biāo)。

對于適用多個機型的產(chǎn)品，應(yīng)提供如產(chǎn)品說明書【適用儀器】項中所列的所有型號儀器的性能評估資料及其實驗參數(shù)。

性能評估應(yīng)采用臨床樣本，并盡量采用異常人群（低蛋白血癥、肝硬化患者）樣本，如果線性范圍低端樣本不足，可以考慮補充低風(fēng)險患者樣本或健康人群。

1.分析靈敏度：分析靈敏度的確定常使用同批號試劑對已知濃度樣品（或有證參考物質(zhì)）在試劑盒規(guī)定參數(shù)讀數(shù)點下的吸光度值（A）或差值（ΔA），換算成40.0g/L的吸光度或吸光度差值。

2.線性范圍：建立試劑線性范圍所用的樣本基質(zhì)應(yīng)盡可能與臨床實際檢測的樣本相似，理想的樣本為分析物濃度接近預(yù)期測定上限的混合人血清，且應(yīng)充分考慮多倍稀釋對樣本基質(zhì)的影響。

3.精密度：測量精密度的評估應(yīng)至少包括兩個濃度水平的樣本進行，兩個濃度都應(yīng)在試劑盒的測量范圍內(nèi)且有一定的臨床意義（醫(yī)學(xué)決定水平），通常選用該檢測指標(biāo)的正常參考區(qū)間附近和異常高值樣本。兩個濃度都選用高值樣品，可能致CV偏小，也不能選用接近最低檢出限的樣品，可能致CV偏大。

4.準(zhǔn)確度

（1）與企業(yè)內(nèi)部白蛋白校準(zhǔn)品（液）的比對研究

使用已溯源的企業(yè)內(nèi)部定值參考品進行驗證，重點觀察檢測結(jié)果的偏差情況。

（2）方法學(xué)比對

采用參考方法或國內(nèi)/國際普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的已上市同類試劑作為參比方法，與擬申報試劑同時檢測臨床樣品，從測定結(jié)果間的差異了解擬申報試劑與參比方法間的偏倚。

在實施方法學(xué)比對前，應(yīng)分別對擬申報試劑和對比試劑進行初步評估，只有在確認(rèn)兩者都分別符合各自相關(guān)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)后方可進行比對試驗。方法學(xué)比對時應(yīng)注意質(zhì)量控制、樣本類型、濃度分布范圍并對結(jié)果進行合理的統(tǒng)計學(xué)分析。

5.干擾物質(zhì)及交叉反應(yīng)研究。

（五）參考區(qū)間確定資料

參考區(qū)間確定所采用的樣本來源、確定方法及詳細(xì)的試驗資料。

（六）穩(wěn)定性研究資料

穩(wěn)定性研究資料主要涉及申報試劑的穩(wěn)定性研究。包括效期穩(wěn)定性（實時穩(wěn)定性）、運輸穩(wěn)定性、開瓶穩(wěn)定性及熱穩(wěn)定性等研究，申請人可根據(jù)實際需要選擇合理的穩(wěn)定性研究方案。穩(wěn)定性研究資料應(yīng)包括研究方法的確定依據(jù)、具體的實施方案、詳細(xì)的研究數(shù)據(jù)以及結(jié)論。對于效期穩(wěn)定性研究，應(yīng)提供至少三批樣品在實際儲存條件下保存至成品有效期后的研究資料。

（七）臨床評價資料

試劑（盒）按照《體外診斷試劑注冊管理辦法》及《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導(dǎo)原則的通告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第16號）進行臨床試驗。

1.研究方法

選擇境內(nèi)已批準(zhǔn)上市、臨床普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的同類產(chǎn)品作為對比試劑，采用試驗用體外診斷試劑（以下稱考核試劑）與之進行對比試驗研究，證明本品與已上市產(chǎn)品等效或優(yōu)于已上市產(chǎn)品。建議企業(yè)盡量選擇方法學(xué)相同、線性范圍及精密度等性能接近的同類試劑作為對比試劑。

2.臨床試驗機構(gòu)的選擇

（1）第二類產(chǎn)品申請人應(yīng)當(dāng)選定不少于2家（含2家）國家食品藥品監(jiān)督管理總局資質(zhì)認(rèn)可的臨床試驗機構(gòu)開展臨床試驗。

（2）臨床試驗機構(gòu)應(yīng)有能力提供臨床評價所需的各類樣本，實驗操作人員有足夠的時間熟悉檢測系統(tǒng)的各環(huán)節(jié)（儀器、試劑、質(zhì)控及操作程序等），熟悉臨床試驗方案。在整個實驗中，考核試劑和對比試劑都應(yīng)處于有效的質(zhì)量控制下，定期對儀器進行校準(zhǔn)，最大限度保證試驗數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性及可重復(fù)性。

（3）不同的臨床試驗機構(gòu)應(yīng)盡可能使用同一批次考核試劑進行臨床試驗，以便對數(shù)據(jù)進行科學(xué)客觀的統(tǒng)計分析。

（4）對比試劑統(tǒng)一。

3.臨床試驗方案

臨床試驗實施前，研究人員應(yīng)從流行病學(xué)、統(tǒng)計學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、檢驗醫(yī)學(xué)等多方面考慮，設(shè)計科學(xué)合理的臨床研究方案。各臨床研究機構(gòu)的方案設(shè)置應(yīng)基本一致，且保證在整個臨床試驗過程中遵循預(yù)定的方案實施，不可隨意改動。整個試驗過程應(yīng)在臨床研究機構(gòu)的實驗室內(nèi)并由本實驗室的技術(shù)人員操作完成，申報單位的技術(shù)人員除進行必要的技術(shù)指導(dǎo)外，不得隨意干涉實驗進程，尤其是數(shù)據(jù)收集過程。

試驗方案中應(yīng)確定嚴(yán)格的病例納入/排除標(biāo)準(zhǔn)，任何已經(jīng)入選的病例再被排除出臨床研究都應(yīng)記錄在案并明確說明原因。在試驗操作過程中和判定試驗結(jié)果時應(yīng)采用盲法及樣本隨機分配以保證試驗結(jié)果的客觀性。對于新方法測定白蛋白試劑建議明確測定原理或方法學(xué)定義的研究，應(yīng)在方案中明確前后兩次濃度變化有臨床意義的標(biāo)準(zhǔn)。臨床試驗中所涉及的樣本類型應(yīng)與產(chǎn)品說明書一致，且每種樣本類型例數(shù)的選擇應(yīng)符合基本的統(tǒng)計學(xué)要求。臨床試驗機構(gòu)選用的對比試劑與其適用機型匹配。

4.研究對象選擇

4.1臨床試驗樣本量的確定：申請人或臨床研究者應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品臨床使用目的，與該產(chǎn)品相關(guān)疾病的臨床發(fā)生率確定臨床研究的樣本量。在符合指導(dǎo)原則有關(guān)最低樣本要求的前提下，還應(yīng)符合統(tǒng)計學(xué)要求。

4.1.1臨床研究的總樣本數(shù)至少為200例。

4.1.2應(yīng)考慮樣本量的分布。樣本量的選擇應(yīng)符合統(tǒng)計學(xué)及相關(guān)指導(dǎo)原則的要求。

4.1.3樣本濃度應(yīng)覆蓋考核試劑檢測范圍，盡可能均勻分布。不少于30%樣本的測定值處于參考區(qū)間以外，但在測量范圍內(nèi)。

4.2如果考核試劑同時適用于血清或血漿樣本類型，可完成一個樣本類型（血清或血漿）不少于200例的臨床研究，同時可選至少100例血清或血漿同源樣本進行比對研究。

4.3建議在臨床試驗中選擇部分含干擾物質(zhì)的標(biāo)本進行對比研究，包括高脂、溶血、黃疸的樣本。血清中多種蛋白成分如a1-球蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白、觸珠蛋白也會和BCG或BCP反應(yīng)，以從臨床角度驗證對試劑的影響。

5.統(tǒng)計學(xué)分析

對臨床試驗結(jié)果的統(tǒng)計應(yīng)選擇合適的統(tǒng)計方法，如相關(guān)分析、線性回歸、受試者工作特征（Receiver Operating Characteristic curve，ROC）曲線分析等。對于對比實驗的等效性研究，最常用是對考核試劑和對比試劑兩組檢測結(jié)果的相關(guān)及線性回歸分析，應(yīng)重點觀察相關(guān)系數(shù)（r值）或判定系數(shù)（R2）、回歸擬合方程（斜率和y軸截距）等指標(biāo)。結(jié)合臨床試驗數(shù)據(jù)的正/偏態(tài)分布情況，建議統(tǒng)計學(xué)負(fù)責(zé)人選擇合理的統(tǒng)計學(xué)方法進行分析，統(tǒng)計分析應(yīng)可以證明兩種方法的檢測結(jié)果無明顯統(tǒng)計學(xué)差異。在臨床研究方案中應(yīng)明確統(tǒng)計檢驗假設(shè)，即評價考核試劑與對比試劑是否等效的標(biāo)準(zhǔn)。

6.結(jié)果差異樣本的驗證

在數(shù)據(jù)收集過程中，對于兩種試劑的檢測結(jié)果有明顯差異的樣本，應(yīng)采用臨床上普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的第三種同類試劑進行驗證試驗，同時結(jié)合患者的臨床病情對差異原因及可能結(jié)果進行分析。

7.臨床試驗總結(jié)報告撰寫

根據(jù)《體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導(dǎo)原則》的要求，臨床試驗報告應(yīng)該對試驗的整體設(shè)計及各個關(guān)鍵點給予清晰、完整的闡述，應(yīng)該對整個臨床試驗實施過程、結(jié)果分析、結(jié)論等進行條理分明的描述，并應(yīng)包括必要的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和統(tǒng)計分析方法。建議在臨床總結(jié)報告中對以下內(nèi)容進行詳述。

7.1臨床試驗總體設(shè)計及方案描述

7.1.1臨床試驗的整體管理情況、臨床試驗機構(gòu)選擇、臨床主要研究人員簡介等基本情況介紹；

7.1.2病例納入/排除標(biāo)準(zhǔn)、不同年齡段人群的預(yù)期選擇例數(shù)及標(biāo)準(zhǔn)；

7.1.3樣本類型，樣本的收集、處理及保存等；

7.1.4統(tǒng)計學(xué)方法、統(tǒng)計軟件、評價統(tǒng)計結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)。

7.2具體的臨床試驗情況

7.2.1考核試劑和對比試劑的名稱、批號、有效期及所用機型等信息；

7.2.2對各研究單位的病例數(shù)、病種分布情況進行總合，建議以列表或圖示方式給出具體例數(shù)及百分比；

7.2.3質(zhì)量控制，試驗人員培訓(xùn)、儀器日常維護、儀器校準(zhǔn)、質(zhì)控品運行情況，對檢測精密度、室內(nèi)質(zhì)控（質(zhì)控品測量值）、抽查結(jié)果評估；

7.2.4具體試驗過程，樣本檢測、數(shù)據(jù)收集、樣本長期保存、結(jié)果不一致樣本的校驗等。

7.3統(tǒng)計學(xué)分析

7.3.1數(shù)據(jù)預(yù)處理、差異數(shù)據(jù)的重新檢測或第三方驗證以及是否納入最終數(shù)據(jù)統(tǒng)計、對異常值或缺失值的處理、研究過程中是否涉及對方案的修改。

7.3.2定量值相關(guān)性和一致性分析

用回歸分析驗證兩種試劑結(jié)果的相關(guān)性，以y=a+bx和R2的形式給出回歸分析的擬合方程，其中：y是考核試劑結(jié)果，x是對比試劑結(jié)果，b是方程斜率，a是y軸截距，R2是判定系數(shù)，同時應(yīng)給出b的95%（或99%）置信區(qū)間，定量值結(jié)果應(yīng)無明顯統(tǒng)計學(xué)差異。

另外考慮到在不同的樣本濃度區(qū)間試劑的性能可能存在一定差異，因此，建議對總體濃度范圍進行區(qū)間分層統(tǒng)計，對不同濃度區(qū)間內(nèi)的結(jié)果進行相關(guān)性分析以更好的驗證兩種試劑的相關(guān)性。

7.4討論和結(jié)論

對總體結(jié)果進行總結(jié)性描述并簡要分析試驗結(jié)果，對本次臨床研究有無特別說明，最后得出臨床試驗結(jié)論。

8.變更事項相關(guān)的臨床試驗

涉及產(chǎn)品檢測條件優(yōu)化、增加與原樣本類型具有可比性的其他樣本類型等變更事項，臨床試驗總樣本數(shù)至少為100例,并在至少2家(含2家)臨床試驗機構(gòu)開展臨床試驗；變更參考區(qū)間的變化及增加臨床適應(yīng)癥等變更事項，應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品具體變更情況，酌情增加臨床試驗總樣本數(shù)。

（八）產(chǎn)品風(fēng)險分析資料

1.產(chǎn)品主要風(fēng)險：體外診斷試劑產(chǎn)品的風(fēng)險管理報告應(yīng)符合YY/T 0316—2008《醫(yī)療器械 風(fēng)險管理對醫(yī)療器械的應(yīng)用》的有關(guān)要求，審查要點包括：

（1）與安全性有關(guān)特征的判定可參考YY/T 0316—2008附錄C。

（2）危害分析是否全面可參考YY/T 0316—2008附錄E。

（3）風(fēng)險控制的方案與實施、綜合剩余風(fēng)險的可接受性評價及生產(chǎn)和生產(chǎn)后監(jiān)視相關(guān)方法可參考YY/T 0316—2008附錄F、G、J、H。

白蛋白測定試劑（盒）的初始可預(yù)見性危害主要存在于產(chǎn)品的設(shè)計開發(fā)、生產(chǎn)和使用環(huán)節(jié)。如產(chǎn)品設(shè)計開發(fā)方面的初始可預(yù)見危害主要有：關(guān)鍵原材料選擇、配方各組分適宜的濃度等；生產(chǎn)方面的初始可預(yù)見危害主要有：水質(zhì)的控制、準(zhǔn)確稱量、配制過程的控制（交叉污染）等；使用的初始可預(yù)見危害主要有：未限制非預(yù)期使用，未限制使用環(huán)境及人員，未告知正確使用，與生化分析儀檢測系統(tǒng)匹配使用參數(shù)不當(dāng)?shù)??？赡艿娘L(fēng)險及其控制清單詳見表1。

2.產(chǎn)品的安全性是否符合安全要求。

當(dāng)產(chǎn)品成分中含有人源或動物源性材料時適用，應(yīng)將此部分內(nèi)容體現(xiàn)在注冊的技術(shù)資料中，如綜述資料和/或原材料研究。生物安全性應(yīng)滿足企業(yè)規(guī)定的要求，如包括但不限于HBs抗原、HIV-1/2抗體、HCV抗體及梅毒抗體檢測為陰性。

（九）產(chǎn)品技術(shù)要求

申請人應(yīng)當(dāng)在原材料質(zhì)量和生產(chǎn)工藝穩(wěn)定的前提下,根據(jù)申請人產(chǎn)品研制、前期臨床評價等結(jié)果,依據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)及有關(guān)文獻，按照《關(guān)于發(fā)布醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則的通告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第9號）的有關(guān)要求，編寫產(chǎn)品技術(shù)要求，內(nèi)容主要包含產(chǎn)品性能指標(biāo)和檢驗方法。

1.產(chǎn)品適用的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)

（1）GB/T 191—2008 包裝儲運圖示標(biāo)志

（2）GB/T 21415—2008 體外診斷醫(yī)療器械 生物樣品中量的測量 校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)賦值的計量學(xué)溯源性

（3）GB/T 26124—2011 臨床化學(xué)體外診斷試劑（盒）

（4）YY/T 0316—2008 醫(yī)療器械 風(fēng)險管理對醫(yī)療器械的應(yīng)用

（5）YY 0466—2003 醫(yī)療器械 用于醫(yī)療器械標(biāo)簽、標(biāo)記和提供信息的符號

（6）YY/T 1228—2014白蛋白測定試劑（盒）

注：以上標(biāo)準(zhǔn)適用最新版本。

2.主要性能指標(biāo)

2.1外觀：至少應(yīng)符合如下要求：

2.1.1試劑（盒）各組分應(yīng)齊全、完整、液體無滲漏、無破損；

2.2.2中英文包裝標(biāo)簽、標(biāo)識字跡應(yīng)清晰。

2.2裝量：應(yīng)不少于標(biāo)識量。

2.3試劑空白吸光度：應(yīng)符合生產(chǎn)企業(yè)宣稱的要求。

2.4分析靈敏度：用已知濃度或活性的樣品進行測試，記錄在試劑（盒）規(guī)定參數(shù)下產(chǎn)生的吸光度改變。換算為n單位吸光度差值（ΔA）或吸光度變化（ΔA/min）。應(yīng)符合生產(chǎn)企業(yè)給定范圍。

2.5線性范圍：

用達到線性區(qū)間下限的低濃度樣本稀釋達到線性區(qū)間上限的高濃度樣本，混合成至少5個稀釋濃度（xi）。用試劑（盒）分別測試以上樣本，每個稀釋濃度測試3次，分別求出每個稀釋濃度檢測結(jié)果的均值（yi）。以稀釋濃度（xi）為自變量，以檢測結(jié)果均值（yi）為因變量求出線性回歸方程y=a+bx。計算線性回歸的相關(guān)系數(shù)（r）。

稀釋濃度（xi）代入求出線性回歸方程，計算yi的估計值及yi與估計值的相對偏差或絕對偏差。

試劑（盒）線性在[10.0，60.0]g/L區(qū)間內(nèi)：

2.5.1相關(guān)系數(shù)r值≥0.990。

2.5.2[10.0，20.0]g/L區(qū)間內(nèi)，線性偏差應(yīng)不超過±4.0g/L；[20.1，60.0]g/L區(qū)間內(nèi)，線性偏差應(yīng)不超過±10％。

2.6精密度

2.6.1重復(fù)性：在重復(fù)性實驗條件下，同一批次試劑對檢測范圍內(nèi)某個濃度的白蛋白樣本進行重復(fù)檢測10次，變異系數(shù)CV（%）≤2.0%。

2.6.2批間差：三個批次的檢測試劑對檢測范圍內(nèi)某個濃度的白蛋白樣本進行重復(fù)性檢測，其變異系數(shù)CV（%）值應(yīng)≤5.0%。檢測結(jié)果計算公式如下：

式中：

2.7準(zhǔn)確度：用可用評價常規(guī)方法的有證參考物質(zhì)(CRM)對試劑（盒）進行測試，重復(fù)檢測3次，取測試結(jié)果均值（M），按公式（3）計算相對偏差（B%）。相對偏差應(yīng)不大于±6.0%。

B%＝(M－T)／T×100%  ………………………………（3）

式中：M為測試結(jié)果均值；

T為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)標(biāo)示值，或各濃度人血清定值。

2.8穩(wěn)定性

2.8.1開瓶穩(wěn)定性：試劑（盒）在規(guī)定的貯存條件下保存至規(guī)定的時間，產(chǎn)品的性能應(yīng)至少符合線性、準(zhǔn)確度和重復(fù)性的要求。

2.8.2復(fù)溶穩(wěn)定性（干粉或凍干試劑適用）：干粉試劑開瓶后（復(fù)溶后）在規(guī)定的貯存條件下保存至預(yù)期時間內(nèi)，產(chǎn)品的性能應(yīng)至少符合線性、準(zhǔn)確度和重復(fù)性。

2.8.3效期穩(wěn)定性：試劑（盒）在規(guī)定的貯存條件下保存至有效期末，產(chǎn)品的性能應(yīng)至少符合線性、重復(fù)性和準(zhǔn)確度的要求。

2.9校準(zhǔn)品和質(zhì)控品（如適用）

若試劑盒配套校準(zhǔn)品和質(zhì)控品，應(yīng)參照GB/T 21415—2008《體外診斷醫(yī)療器械 生物樣品中量的測量 校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)賦值的計量學(xué)溯源性》的要求溯源至國家或國際標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，并提供校準(zhǔn)品溯源性文件及質(zhì)控品定值說明。溯源性文件中應(yīng)有賦值程序、溯源鏈和不確定度及其評定要求。

（十）產(chǎn)品注冊檢驗報告

根據(jù)《體外診斷試劑注冊管理辦法》要求，首次申請注冊的第二類產(chǎn)品應(yīng)提供具有相應(yīng)醫(yī)療器械檢驗資質(zhì)和承檢范圍的醫(yī)療器械檢驗機構(gòu)出具的注冊檢驗報告和產(chǎn)品技術(shù)要求預(yù)評價意見。

（十一）產(chǎn)品說明書

產(chǎn)品說明書的格式應(yīng)符合《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則的通告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第17號）的要求。產(chǎn)品說明書的所有內(nèi)容均應(yīng)與申請人提交的注冊申報資料中的相關(guān)研究結(jié)果保持一致,下面對白蛋白測定試劑(盒)說明書的重點內(nèi)容進行詳細(xì)說明，以指導(dǎo)注冊申報人員更合理地完成說明書編制。

1.【預(yù)期用途】

白蛋白測定試劑盒用于體外定量檢測血清和/或血漿中白蛋白濃度，適用的樣本類型應(yīng)結(jié)合實際的臨床研究情況進行確認(rèn)。臨床上主要用于肝臟功能及營養(yǎng)狀況等疾病的輔助評價等。

2.【檢測原理】

白蛋白在一定pH值緩沖液中（pH4.2—5.2）帶正電荷，在有非離子型表面活性劑存在時，可與帶負(fù)電荷的染料（溴甲酚綠或溴甲酚紫）結(jié)合產(chǎn)生有色（藍(lán)綠色或綠色）復(fù)合物，在一定波長（600—630nm）處比色，顏色的深度與白蛋白濃度成正比。與同樣處理的白蛋白標(biāo)準(zhǔn)比較，可求得白蛋白含量。

3.【主要組成成分】

（1）說明試劑包含主要組分的名稱、數(shù)量、比例或濃度等信息。

（2）試劑中不包含但對該項檢測必須的組分，企業(yè)應(yīng)列出相關(guān)試劑/耗材的名稱、貨號及其他相關(guān)信息。

（3）試劑盒中不包含質(zhì)控品或其他耗材，應(yīng)說明經(jīng)驗證后推薦配合使用的商品化質(zhì)控品、校準(zhǔn)品或其他耗材的生產(chǎn)企業(yè)、產(chǎn)品名稱以及產(chǎn)品貨號等詳細(xì)信息；如包含校準(zhǔn)品和/或質(zhì)控品，應(yīng)說明其主要組成成分及其生物學(xué)來源，校準(zhǔn)品應(yīng)注明其定值及溯源性，質(zhì)控品應(yīng)明確靶值范圍。

4.【儲存條件及有效期】

    試劑的開封穩(wěn)定性、效期穩(wěn)定性、運輸穩(wěn)定性等信息做詳細(xì)介紹。并對開封后未使用產(chǎn)品允許暴露于空氣中的溫度、濕度及有效期等條件予以明確。

5.【樣本要求】重點明確以下內(nèi)容：

（1）樣本采集：采集時間點是否受臨床癥狀、用藥情況等因素的影響，具體采集部位及類型，詳述具體的操作方法或列出相關(guān)操作指南文件以指導(dǎo)使用者（最好能夠給出具體圖示），盡量減少由于樣本采集或處理不當(dāng)對實驗造成的影響。

（2）若待測樣本為血漿應(yīng)說明所采用的抗凝劑類型。

（3）樣本處理及保存：樣本的保存條件及期限（短期、長期）、運輸條件等。冷藏/冷凍樣本檢測前是否須恢復(fù)室溫，凍融次數(shù)限制。

6.【適用儀器】所有適用的儀器型號，并提供與儀器有關(guān)的重要信息以指導(dǎo)用戶操作。

7.【檢驗方法】詳細(xì)說明實驗操作的各個步驟，包括：

（1）實驗條件：實驗環(huán)境的溫度、濕度等注意事項，檢驗試劑及樣本復(fù)溫等要求。

（2）試劑使用方法（手工/半自動/全自動）、注意事項。

（3）詳述待測樣品的預(yù)處理方法、步驟及注意事項。

（4）明確樣本檢測加樣量及反應(yīng)時間。

（5）詳述配套儀器設(shè)置過程。

（6）質(zhì)量控制過程以及注意事項。

8.【檢驗結(jié)果的解釋】

結(jié)合質(zhì)控品對所有可能出現(xiàn)的結(jié)果進行合理的解釋。本試劑的檢測結(jié)果僅供臨床參考，對患者的臨床診治應(yīng)結(jié)合其癥狀/體征、病史、其他實驗室檢查及治療反應(yīng)等情況綜合考慮。明確有可能存在的數(shù)值升高因素及數(shù)值降低因素，說明對何種條件下需要進行重復(fù)檢測，以及在重復(fù)檢測時對待測樣本可能采取的優(yōu)化條件等進行詳述。

9.【檢驗方法的局限性】

（1）明確干擾物質(zhì)及濃度范圍對檢測結(jié)果的影響；

（2）操作時必須嚴(yán)格按照操作規(guī)程，精心操作才能得到正確結(jié)果，對操作程序作任何修改都可能影響結(jié)果。

（3）檢測結(jié)果超出試劑盒線性范圍的處理方法。

（4）不同方法pH值要求對測定結(jié)果的影響

10.【產(chǎn)品性能指標(biāo)】

說明該產(chǎn)品主要性能指標(biāo)，應(yīng)至少包括：外觀、裝量、試劑空白吸光度、分析靈敏度、線性范圍、精密度、準(zhǔn)確度和穩(wěn)定性等。產(chǎn)品性能指標(biāo)應(yīng)不低于YY/T 1228—2014 《白蛋白測定試劑（盒）》標(biāo)準(zhǔn)要求。

11.【注意事項】

應(yīng)至少包括以下內(nèi)容：

（1）有關(guān)人源組分（如有）的警告，如：試劑內(nèi)校準(zhǔn)品或其他可能含有人源物質(zhì)的組分，雖已經(jīng)通過了HBs-Ag、HIV1/2-Ab、HCV-Ab等生物傳染性項目的檢測，但截至目前，沒有任何一項檢測可以確保絕對安全，故仍應(yīng)將這些組分作為潛在傳染源對待。

（2）建議實驗室的環(huán)境要求，如環(huán)境溫度、濕度等。

（3）對采集樣本的要求，建議使用新鮮血清或血漿，勿使用溶血樣本，明確樣本的處理辦法。

（4）對所有樣本和反應(yīng)廢棄物都視為傳染源進行處理。

（5）不同方法應(yīng)說明對檢測結(jié)果的影響因素；使用不同生產(chǎn)商的試劑對同一份樣本進行檢測可能會存在差異。

（6）本試劑盒的檢測結(jié)果僅供臨床參考，對患者的臨床診治應(yīng)結(jié)合其癥狀/體征、病史、其他實驗室檢查及治療反應(yīng)等情況綜合考慮。

12.【參考文獻】

注明引用的參考文獻。

13.【基本信息】

（1）注冊人與生產(chǎn)企業(yè)為同一企業(yè)的，按以下格式標(biāo)注基本信息：

注冊人/生產(chǎn)企業(yè)名稱

住所

聯(lián)系方式

售后服務(wù)單位名稱

聯(lián)系方式

生產(chǎn)地址

生產(chǎn)許可證編號

（2）委托生產(chǎn)的按照以下格式標(biāo)注基本信息：

注冊人名稱

住所

聯(lián)系方式

售后服務(wù)單位名稱

聯(lián)系方式

受托企業(yè)的名稱

住所

生產(chǎn)地址

生產(chǎn)許可證編號

三、審查關(guān)注點

（一）產(chǎn)品名稱的要求

試劑（盒）的命名應(yīng)參考食品藥品監(jiān)管部門發(fā)布的醫(yī)療器械分類目錄或國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)上的通用名稱，一般為“白蛋白測定試劑（盒）（溴甲酚綠法）、白蛋白測定試劑（盒）（溴甲酚紫法）”。

（二）試劑（盒）組成（見注冊申報資料要求）

（三）反應(yīng)機理或工作原理（見注冊申報資料要求）

（四）試劑主要性能指標(biāo)及其計算方法（見注冊申報資料要求）

（五）產(chǎn)品適用的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)

產(chǎn)品適用及引用標(biāo)準(zhǔn)的審查可以分兩步來進行。首先對引用標(biāo)準(zhǔn)的齊全性和適宜性進行審查，也就是在編寫注冊產(chǎn)品技術(shù)要求時與產(chǎn)品相關(guān)的國家、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)是否進行了引用，以及引用是否準(zhǔn)確。

其次對引用標(biāo)準(zhǔn)的采納情況進行審查。即所引用標(biāo)準(zhǔn)中的條款要求，是否在產(chǎn)品技術(shù)要求中進行了實質(zhì)性的條款引用。這種引用通常采用兩種方式，文字表述繁多內(nèi)容復(fù)雜的可以直接引用標(biāo)準(zhǔn)及條文號，比較簡單的也可以直接引述具體要求。

產(chǎn)品技術(shù)要求應(yīng)符合相關(guān)的強制性國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)和有關(guān)法律、法規(guī)的規(guī)定，并按國家食品藥品監(jiān)督管理局發(fā)布的《醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則》的要求編制。

（六）產(chǎn)品說明書和標(biāo)簽樣稿

應(yīng)符合《醫(yī)療器械說明書和標(biāo)簽管理規(guī)定》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第6號）和《體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則》的要求，同時應(yīng)符合YY/T 0466.1 《醫(yī)療器械 用于醫(yī)療器械標(biāo)簽、標(biāo)記和提供信息的符號 第1部分：通用要求》（ISO15223-1）。

四、名詞解釋

（一）準(zhǔn)確度（Accuracy）：一個測量值與可接受的參考值間的一致程度。

（二）分析靈敏度（Analytical Sensitivity）：樣品中以一定概率可被聲明與零有差異的被測量的最低值。本指導(dǎo)原則中的分析靈敏度是指測定規(guī)定濃度樣本，在試劑盒規(guī)定參數(shù)讀數(shù)點下的吸光度值（A）或差值（ΔA）為檢測系統(tǒng)的分析靈敏度。

（三）精密度（Precision）：在規(guī)定條件下，相互獨立的測試結(jié)果之間的一致程度。精密度的程度是用統(tǒng)計學(xué)方法得到的測量不精密度的數(shù)字形式表示，如標(biāo)準(zhǔn)差（SD）和變異系數(shù)（CV）。

五、參考文獻

（一）《體外診斷試劑注冊管理辦法》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第5號）

（二）《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導(dǎo)原則的通告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第44號）

（三）《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則的通告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第17號）

（四）《食品藥品監(jiān)管總局關(guān)于印發(fā)體外診斷試劑分類子目錄的通知》（食藥監(jiān)械管〔2013〕242號）

（五）《臨床檢驗質(zhì)量管理技術(shù)基礎(chǔ)》，馮仁豐，第二版，上?？茖W(xué)技術(shù)文獻出版社，2007年4月

（六）臨床化學(xué)體外診斷試劑(盒)產(chǎn)品技術(shù)審評規(guī)范（2011版）

（七）GB/T 21415—2008 體外診斷醫(yī)療器械－生物樣品中量的測量－校準(zhǔn)物和控制物質(zhì)賦值的計量學(xué)溯源性（ISO 17511:2003，IDT）

（八）WS/T 404.2—2012 臨床常用生化檢驗項目參考區(qū)間 第2部分：血清總蛋白、白蛋白

（九）定性檢測體外診斷試劑(盒)產(chǎn)品技術(shù)審評規(guī)范（2012版）

（十）YY/T 1228—2014 白蛋白測定試劑（盒）

白蛋白測定試劑（盒）注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則
編制說明

一、指導(dǎo)原則編寫目的

（一）本指導(dǎo)原則編寫的目的是用于指導(dǎo)和規(guī)范白蛋白檢測試劑（盒）產(chǎn)品注冊申報過程中審查人員對注冊材料的技術(shù)審評；同時也可指導(dǎo)生產(chǎn)企業(yè)的產(chǎn)品注冊工作。

（二）本指導(dǎo)原則旨在讓初次接觸該類產(chǎn)品的注冊審查人員對產(chǎn)品機理、結(jié)構(gòu)、主要性能、預(yù)期用途等各個方面有所了解，同時讓技術(shù)審查人員在產(chǎn)品注冊技術(shù)審評時把握基本的尺度，對產(chǎn)品安全性、有效性作出系統(tǒng)評價。

二、指導(dǎo)原則編寫依據(jù)

本指導(dǎo)原則編寫主要依據(jù)如下：

（一）《醫(yī)療器械監(jiān)督管理條例》（國務(wù)院令第650號）

（二）《體外診斷試劑注冊管理辦法》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第5號）

（三）《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導(dǎo)原則的通告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第44號）

（四）《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則的通告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第17號）

（五）YY/T 1228—2014《白蛋白測定試劑（盒）》

（六）《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第三版）

（七）國家食品藥品監(jiān)督管理部門發(fā)布的其他規(guī)范性文件

（八）現(xiàn)行的國家標(biāo)準(zhǔn)和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)

三、指導(dǎo)原則部分內(nèi)容編寫考慮

（一）產(chǎn)品的主要技術(shù)指標(biāo)制定主要參考相關(guān)國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)YY/T 1228—2014《白蛋白測定試劑（盒）》、GB/T 26124—2011《臨床化學(xué)體外診斷試劑（盒）》。

（二）為了提高本指導(dǎo)原則的通用性，編寫中明確本指導(dǎo)原則適用于BCG和BCP法。由于其他樣本類型測定方法（比濁法、酶標(biāo)法和其他染料和化學(xué)試劑等），如胸腹水、腦脊液、尿液樣本中白蛋白測定方法在制定國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的性能指標(biāo)上不一致，如果擬申報試劑已有相應(yīng)的專用國家/行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)或相應(yīng)方法學(xué)的通用標(biāo)準(zhǔn)要求發(fā)布，則企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的要求不得低于上述標(biāo)準(zhǔn)要求。

四、指導(dǎo)原則編寫單位和人員

本指導(dǎo)原則的編寫成員由江西省食品藥品監(jiān)督管理局、江西省藥品審評中心、江西省醫(yī)療器械質(zhì)量監(jiān)督檢驗中心等專家共同組成。