附件：人類免疫缺陷病毒檢測試劑臨床試驗(yàn)注冊審查指導(dǎo)原則（2023年修訂版）（2024年第4號）.doc

人類免疫缺陷病毒檢測試劑臨床試驗(yàn)注冊審查指導(dǎo)原則（2023年修訂版）

本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊申請人對人類免疫缺陷病毒檢測試劑臨床試驗(yàn)的設(shè)計及開展，同時也為技術(shù)審評部門對注冊申報資料的技術(shù)審評提供參考。

本指導(dǎo)原則是針對人類免疫缺陷病毒檢測試劑臨床評價的一般要求，申請人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對注冊申報資料的內(nèi)容進(jìn)行充實(shí)和細(xì)化。

本指導(dǎo)原則是對申請人和審查人員的指導(dǎo)性文件，但不包括注冊審批所涉及的行政事項(xiàng)，亦不作為法規(guī)強(qiáng)制執(zhí)行，如果有能夠滿足相關(guān)法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但需要詳細(xì)闡明理由，并對其科學(xué)合理性進(jìn)行驗(yàn)證，提供詳細(xì)的研究資料和驗(yàn)證資料，相關(guān)人員應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。

本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)體系以及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定的，隨著法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)的不斷完善，以及科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時進(jìn)行調(diào)整。

一、適用范圍

人類免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus，HIV）檢測試劑是指利用免疫學(xué)及分子生物學(xué)等方法原理對人血清、血漿或其他體液中的特定的HIV生物學(xué)標(biāo)記物，包括HIV 1型（HIV-1）p24抗原、HIV抗體、HIV核酸等進(jìn)行定量或定性分析的試劑。

本指導(dǎo)原則適用于利用免疫層析法、化學(xué)發(fā)光法、時間分辨免疫熒光法、免疫印跡法等免疫學(xué)方法對HIV抗原和/或抗體進(jìn)行定性檢測的體外診斷試劑，以及應(yīng)用分子生物學(xué)方法（如實(shí)時熒光聚合酶鏈反應(yīng)等）對HIV核糖核酸進(jìn)行定量或定性檢測和分析的體外診斷試劑，適用于首次注冊產(chǎn)品及申請變更注冊的產(chǎn)品。

本指導(dǎo)原則不適用于國家法定血源篩查用HIV檢測試劑。

二、臨床試驗(yàn)設(shè)計

臨床試驗(yàn)的開展、方案的制定以及報告的撰寫等均應(yīng)符合相關(guān)法規(guī)及《體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》的要求，如相關(guān)法規(guī)、文件有更新，臨床試驗(yàn)應(yīng)符合更新后的要求。

（一）臨床試驗(yàn)設(shè)計

1.臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)及人員

申請人應(yīng)選擇不少于3家經(jīng)醫(yī)療器械臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)備案的臨床機(jī)構(gòu)開展臨床試驗(yàn)。建議在選擇臨床單位時，綜合流行病學(xué)背景、HIV的特性等因素選擇臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)，臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)的實(shí)驗(yàn)操作人員應(yīng)熟悉檢測系統(tǒng)的各環(huán)節(jié)（儀器、試劑、質(zhì)控及操作程序等），熟悉臨床試驗(yàn)方案。

2.臨床試驗(yàn)適用人群和樣本類型

    2.1適用人群

對于不同的檢測試劑，其預(yù)期用途不同，因此入組人群亦不同。申請人應(yīng)根據(jù)不同的要求入組適用人群開展臨床試驗(yàn)。

對于HIV抗體檢測、抗原抗體聯(lián)合檢測、HIV核酸定性檢測試劑，預(yù)期用途為HIV感染的輔助診斷。入組人群應(yīng)為疑似HIV感染的人群，包括具有HIV相關(guān)的癥狀/體征、以及有相關(guān)流行病學(xué)史的人群。應(yīng)納入HIV感染的不同進(jìn)展階段，包括急性期、無癥狀感染期及艾滋病期病例。為考察申報產(chǎn)品的特異度，臨床試驗(yàn)中還應(yīng)納入可能會對試劑檢測造成干擾的樣本，如自身免疫病患者、類風(fēng)濕因子（RF）陽性的病例、孕婦以及其他可能會造成交叉反應(yīng)的病原體（乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒等）感染的病例等。對于HIV抗體檢測第三代發(fā)光類試劑,應(yīng)選擇至少5套經(jīng)過全面驗(yàn)證的陽轉(zhuǎn)血清盤進(jìn)行檢測，對于抗原抗體聯(lián)合檢測第四代發(fā)光類試劑，應(yīng)選擇至少10套經(jīng)過全面驗(yàn)證的陽轉(zhuǎn)血清盤進(jìn)行檢測，以評價申報產(chǎn)品對于HIV感染早期的檢出能力。對于抗原抗體聯(lián)合檢測試劑，為充分評價抗原的檢測性能，應(yīng)納入至少10例單獨(dú)抗原陽性的樣本，如臨床試驗(yàn)中難以獲得，可使用商業(yè)化的血清盤進(jìn)行檢測。

對于 HIV RNA定量檢測試劑，預(yù)期用途為通過對患者血清或血漿中人類免疫缺陷病毒核酸基線水平和變化情況的監(jiān)測，用于評估抗病毒治療的應(yīng)答和治療效果。入組人群應(yīng)以已確診HIV感染的病例為主，應(yīng)包括正在接受抗病毒治療的患者以及未接受抗病毒治療的患者，確保樣本HIV病毒載量覆蓋申報產(chǎn)品的線性范圍。同時應(yīng)入組一部分陰性病例來考察其檢測的特異度。如此類試劑預(yù)期用途除用于治療監(jiān)測外，還可用于HIV感染的輔助診斷，則還應(yīng)按照上述關(guān)于輔助診斷預(yù)期用途的臨床試驗(yàn)設(shè)計開展相應(yīng)的臨床評價。

對于HIV抗體檢測試劑（免疫印跡法），預(yù)期用途為用于經(jīng)HIV抗體篩查試驗(yàn)復(fù)檢為有反應(yīng)性的樣本的確認(rèn)。入組人群應(yīng)以HIV抗體篩查試驗(yàn)復(fù)檢為有反應(yīng)性的病例。為了能夠考察確證試劑的特異度，臨床試驗(yàn)中應(yīng)納入一定數(shù)量的經(jīng)確證試劑檢測為陰性的人群。

我國境內(nèi)流行的HIV主要為HIV-1型M組，其常見的基因型主要為B/B’、BC重組型（包括CRF 07_BC重組型和CRF 08_BC重組型）以及AE重組型（CRF 01_AE重組型）。在選擇HIV感染者病例時，首先應(yīng)根據(jù)HIV流行的情況，選擇能代表我國不同地區(qū)流行基因型的HIV-1感染者病例，以對試劑檢測我國流行的HIV-1病毒的能力進(jìn)行客觀科學(xué)的評價。抗體檢測試劑以及抗原抗體檢測試劑，常見基因型每種不少于10例。對于核酸檢測試劑，每種常見基因型應(yīng)至少30例，同時按基因型對樣本進(jìn)行亞組分析。對于我國境內(nèi)罕見的基因型（1型O組、2型），也應(yīng)進(jìn)行適當(dāng)驗(yàn)證，樣本應(yīng)經(jīng)過科學(xué)的驗(yàn)證和確認(rèn)，考慮到此類樣本的不易獲得性，樣本可來源于HIV感染者，也可來源于經(jīng)過科學(xué)驗(yàn)證的血清盤。

臨床試驗(yàn)中還應(yīng)注意納入一定數(shù)量的低滴度/弱陽性樣本。

2.2樣本類型

樣本類型一般為血清、血漿。如經(jīng)臨床前研究證明分析性能沒有差異，例如血清和血漿樣本，則臨床試驗(yàn)中可進(jìn)行匯總統(tǒng)計。對于口腔粘膜滲出液、尿液等體液樣本，應(yīng)單獨(dú)進(jìn)行臨床評價。

臨床樣本的處理、保存和核酸提取等應(yīng)分別滿足申報產(chǎn)品說明書及對比試劑說明書的相關(guān)要求。

3.對比方法的選擇

對于已有已上市同類產(chǎn)品的試劑，可選擇境內(nèi)已批準(zhǔn)上市、臨床普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的同類產(chǎn)品作為對比試劑，采用試驗(yàn)體外診斷試劑與之進(jìn)行對比試驗(yàn)研究，考察申報產(chǎn)品與對比試劑的一致性。對比試劑的選擇應(yīng)從預(yù)期用途、樣本要求、檢測性能等方面，確認(rèn)其與申報產(chǎn)品具有較好的可比性。

對于無已上市同類產(chǎn)品的新HIV檢測試劑，應(yīng)采用試驗(yàn)體外診斷試劑與臨床參考標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較研究。臨床參考標(biāo)準(zhǔn)即參照臨床公認(rèn)的臨床診療指南、艾滋病診斷標(biāo)準(zhǔn)等進(jìn)行病例診斷的方法。對于核酸定量檢測試劑同時還應(yīng)對其量值與疾病進(jìn)展?fàn)顩r、轉(zhuǎn)歸、治療情況等的相關(guān)性進(jìn)行分析。

對于口腔粘膜滲出液、尿液等體液樣本，無論申報產(chǎn)品采用何種檢驗(yàn)方法，均應(yīng)采用來自同一患者的血液樣本進(jìn)行同源對比試驗(yàn)。檢測血液樣本用對比試劑的檢測性能應(yīng)盡量高于申報產(chǎn)品。

4.最低樣本量

臨床試驗(yàn)樣本量應(yīng)采用適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計學(xué)方法進(jìn)行估算，并詳細(xì)描述所使用統(tǒng)計方法及各參數(shù)的確定依據(jù)。

對于抗體檢測、抗原抗體聯(lián)合檢測以及核酸定性檢測試劑，此部分臨床試驗(yàn)?zāi)康臑樵u估兩種檢測方法之間的一致性，因此建議采用單組目標(biāo)值法公式進(jìn)行最低樣本量的估算。通過陽性符合率和陰性符合率來分別計算所需陽性樣本和陰性樣本的例數(shù)。陽性、陰性符合率的臨床可接受標(biāo)準(zhǔn)（P0）一般建議不低于98%。

公式中，n為樣本量；Z1-α/2、Z1-β為顯著性水平和把握度的標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)分布的分?jǐn)?shù)位，P0為評價指標(biāo)的臨床可接受標(biāo)準(zhǔn)，PT為申報產(chǎn)品評價指標(biāo)預(yù)期值。

對于核酸定量檢測試劑，也應(yīng)選擇合適的樣本量估算的方法進(jìn)行最低樣本量的估算。應(yīng)注意所納入的臨床樣本應(yīng)覆蓋申報產(chǎn)品的線性范圍。

5. 統(tǒng)計分析

5.1定性檢測試劑

應(yīng)選擇合適的統(tǒng)計方法對臨床試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計分析，對于定性檢測的一致性評價，常選擇交叉四格表的形式總結(jié)兩種方法的結(jié)果，評價指標(biāo)一般包括陽性符合率/靈敏度、陰性符合率/特異度，Kappa值等，并計算相應(yīng)的95%置信區(qū)間。

對于兩種方法檢測不一致的樣本，應(yīng)采用臨床參考標(biāo)準(zhǔn)或其他方法再次進(jìn)行確認(rèn)或提供臨床診斷資料以進(jìn)一步明確受試者（采集樣本時）所處的感染狀態(tài)，同時結(jié)合患者的臨床癥狀/體征對差異原因及可能結(jié)果進(jìn)行分析，從而對申報產(chǎn)品的性能進(jìn)行客觀科學(xué)的評價。

5.2核酸定量檢測試劑

5.2.1應(yīng)根據(jù)臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)繪制散點(diǎn)圖，進(jìn)行相關(guān)性分析。

5.2.2采用Bland-Altman法，計算一致性限度，評價兩種檢測結(jié)果的一致性。一致性限度應(yīng)在臨床所能接受的界值范圍內(nèi)。

5.2.3 采用回歸分析對兩種檢測方法的一致性進(jìn)行評價。應(yīng)根據(jù)數(shù)據(jù)分布特點(diǎn)等因素選擇適用的回歸分析方法，如Passing-Bablok回歸、Deming回歸和最小二乘回歸等。回歸分析應(yīng)重點(diǎn)觀察回歸方程的回歸系數(shù)和截距等指標(biāo)，計算回歸系數(shù)和截距的95%置信區(qū)間。

5.2.4 選擇交叉四格表的形式總結(jié)兩種試劑的定性檢測結(jié)果，計算陽性符合率、陰性符合率和總符合率、Kappa值等，并計算相應(yīng)的95%置信區(qū)間。

（二）通用要求

1.臨床試驗(yàn)方案

臨床試驗(yàn)實(shí)施前，研究人員應(yīng)從流行病學(xué)、統(tǒng)計學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)等多方面考慮，設(shè)計科學(xué)合理的臨床試驗(yàn)方案。各臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)應(yīng)執(zhí)行統(tǒng)一的臨床試驗(yàn)方案，且保證在整個臨床試驗(yàn)過程中遵循預(yù)定的方案實(shí)施，不可隨意改動。整個試驗(yàn)過程應(yīng)在臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)并由本實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)人員操作完成，申請人的技術(shù)人員除進(jìn)行必要的技術(shù)指導(dǎo)外，不得隨意干涉試驗(yàn)進(jìn)程，尤其是數(shù)據(jù)收集過程。

試驗(yàn)方案中應(yīng)確定嚴(yán)格的病例納入/排除標(biāo)準(zhǔn)，任何已經(jīng)入選的病例再被排除出臨床試驗(yàn)都應(yīng)記錄在案并明確說明原因。在試驗(yàn)操作過程中和判定試驗(yàn)結(jié)果時應(yīng)采用盲法以保證試驗(yàn)結(jié)果的客觀性。

2.質(zhì)量控制

臨床試驗(yàn)開始前，建議進(jìn)行臨床試驗(yàn)的預(yù)試驗(yàn)，以熟悉并掌握相關(guān)試驗(yàn)方法的操作、儀器、技術(shù)性能等，最大限度控制試驗(yàn)誤差。整個試驗(yàn)過程都應(yīng)處于有效的質(zhì)量控制下，最大限度保證試驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性及精密度。

3.臨床試驗(yàn)報告

臨床試驗(yàn)報告應(yīng)該對試驗(yàn)的整體設(shè)計及各個關(guān)鍵點(diǎn)給予清晰、完整的闡述，應(yīng)該對整個臨床試驗(yàn)實(shí)施過程、結(jié)果分析、結(jié)論等進(jìn)行條理分明的描述，并應(yīng)包括必要的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和統(tǒng)計分析方法，最后得出臨床試驗(yàn)結(jié)論。

三、參考文獻(xiàn)

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