附件：α-淀粉酶檢測(cè)試劑注冊(cè)審查指導(dǎo)原則（2024年第19號(hào)）.doc

α-淀粉酶檢測(cè)試劑注冊(cè)審查指導(dǎo)原則

本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊(cè)申請(qǐng)人對(duì)α-淀粉酶檢測(cè)試劑注冊(cè)申報(bào)資料的準(zhǔn)備及撰寫(xiě)，同時(shí)也為技術(shù)審評(píng)部門(mén)審評(píng)注冊(cè)申報(bào)資料提供參考。

本指導(dǎo)原則是針對(duì)α-淀粉酶檢測(cè)試劑的一般要求，申請(qǐng)人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對(duì)注冊(cè)申報(bào)資料的內(nèi)容進(jìn)行充實(shí)和細(xì)化。如注冊(cè)申請(qǐng)人認(rèn)為有必要增加本指導(dǎo)原則不包含的研究?jī)?nèi)容，可自行補(bǔ)充。

本指導(dǎo)原則是供注冊(cè)申請(qǐng)人和技術(shù)審評(píng)人員使用的指導(dǎo)性文件，但不包括審評(píng)審批所涉及的行政事項(xiàng)，亦不作為法規(guī)強(qiáng)制執(zhí)行，應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。如果有能夠滿足相關(guān)法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但是需要提供詳細(xì)的研究資料和驗(yàn)證資料。

本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)體系以及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定的，隨著法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)的不斷完善，以及科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，相關(guān)內(nèi)容也將適時(shí)進(jìn)行調(diào)整。

一、適用范圍

本指導(dǎo)原則適用于以通過(guò)連續(xù)監(jiān)測(cè)吸光度變化反應(yīng)酶分解底物速率的方法對(duì)人血清、血漿、尿液樣本中α-淀粉酶活性進(jìn)行體外定量檢測(cè)的α-淀粉酶檢測(cè)試劑。其他方法學(xué)或適用樣本的α-淀粉酶檢測(cè)試劑注冊(cè)可參照本指導(dǎo)原則，但應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，如不適用，應(yīng)另行選擇符合自身方法學(xué)特性的技術(shù)要求或評(píng)價(jià)方法。本指導(dǎo)原則適用于進(jìn)行首次注冊(cè)和相關(guān)變更注冊(cè)的產(chǎn)品。

二、注冊(cè)審查要點(diǎn)

（一）監(jiān)管信息

1.產(chǎn)品名稱(chēng)

產(chǎn)品名稱(chēng)應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊(cè)與備案管理辦法》及相關(guān)法規(guī)的要求，如α-淀粉酶檢測(cè)試劑盒（EPS底物法）。產(chǎn)品名稱(chēng)由三部分組成。第一部分：被測(cè)物名稱(chēng)；第二部分：用途，如測(cè)定試劑盒；第三部分：方法或者原理，如EPS底物法、CNPG2底物法等，本部分應(yīng)當(dāng)在括號(hào)中列出。

2.分類(lèi)代碼

根據(jù)《體外診斷試劑分類(lèi)子目錄》，α-淀粉酶檢測(cè)試劑管理類(lèi)別為二類(lèi)，分類(lèi)編碼為6840。

3.注冊(cè)單元?jiǎng)澐?/p>

α-淀粉酶測(cè)定試劑盒如包含不同的包裝規(guī)格，不同規(guī)格間僅試劑組分裝量或檢測(cè)數(shù)有差異，原則上劃分為同一注冊(cè)單元；如包含不同的包裝規(guī)格，不同規(guī)格間除試劑裝量或檢測(cè)數(shù)的差異外，適用于不同的儀器機(jī)型，原則上劃分為同一注冊(cè)單元。校準(zhǔn)品、質(zhì)控品可以與配合使用的α-淀粉酶測(cè)定試劑合并申請(qǐng)注冊(cè)，也可以單獨(dú)申請(qǐng)注冊(cè)。

4.申請(qǐng)人還需按《體外診斷試劑注冊(cè)申報(bào)資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式》要求提交產(chǎn)品列表（如適用）、關(guān)聯(lián)文件、申報(bào)前與監(jiān)管機(jī)構(gòu)的聯(lián)系情況和溝通記錄及符合性聲明等文件。

（二）綜述資料

綜述資料主要包括概述、產(chǎn)品描述、預(yù)期用途、申報(bào)產(chǎn)品上市歷史及其他需說(shuō)明的內(nèi)容。其中，需注意以下內(nèi)容：

1.產(chǎn)品描述中應(yīng)詳述檢測(cè)原理、測(cè)量方法信號(hào)處理方法、數(shù)據(jù)獲取和解讀方式、原材料的來(lái)源制備方法及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、主要生產(chǎn)工藝、檢驗(yàn)方法。

2.如產(chǎn)品包含質(zhì)控品和校準(zhǔn)品，還應(yīng)提供質(zhì)控品的制備方法及賦值情況、校準(zhǔn)品的制備方法及溯源情況的描述。

3.預(yù)期用途臨床適應(yīng)證中，應(yīng)介紹臨床適應(yīng)證的發(fā)生率、易感人群、分析物的詳細(xì)介紹及與臨床適應(yīng)證的關(guān)系，相關(guān)的臨床或?qū)嶒?yàn)室診斷方法。

4.其他需說(shuō)明的內(nèi)容中，應(yīng)提供檢測(cè)系統(tǒng)的其他組成部分（包括但不限于:樣本處理用試劑（如適用）、適用儀器、未包含在試劑盒中的質(zhì)控品和校準(zhǔn)品、獨(dú)立軟件等基本信息）及其在檢測(cè)中發(fā)揮的作用，必要時(shí)應(yīng)提交相應(yīng)的說(shuō)明書(shū)。對(duì)于已獲得批準(zhǔn)的檢測(cè)系統(tǒng)的其他組成部分，應(yīng)當(dāng)提供注冊(cè)證編號(hào)和國(guó)家藥監(jiān)局官方網(wǎng)站公布的注冊(cè)證信息。

綜述資料應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊(cè)與備案管理辦法》和《關(guān)于公布體外診斷試劑注冊(cè)申報(bào)資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告》。

（三）非臨床資料

1.產(chǎn)品風(fēng)險(xiǎn)分析資料

申請(qǐng)人應(yīng)考慮產(chǎn)品壽命周期的各個(gè)環(huán)節(jié)，從預(yù)期用途、可能的使用錯(cuò)誤、與安全性有關(guān)的特征、已知及可預(yù)見(jiàn)的危害等方面的判定以及對(duì)患者風(fēng)險(xiǎn)的估計(jì)進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)分析，應(yīng)符合GB/T 42062《醫(yī)療器械 風(fēng)險(xiǎn)管理對(duì)醫(yī)療器械的應(yīng)用》的要求。

應(yīng)當(dāng)提供風(fēng)險(xiǎn)分析、風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)、風(fēng)險(xiǎn)控制、任何一個(gè)或多個(gè)剩余風(fēng)險(xiǎn)的可接受性評(píng)定、與產(chǎn)品受益相比，綜合評(píng)價(jià)產(chǎn)品風(fēng)險(xiǎn)可接受等內(nèi)容，并說(shuō)明對(duì)于每項(xiàng)已判定危害的下列各個(gè)過(guò)程的可追溯性。

2.體外診斷試劑安全和性能基本原則清單

說(shuō)明產(chǎn)品符合《體外診斷試劑安全和性能基本原則清單》各項(xiàng)適用要求所采用的方法，以及證明其符合性的文件。對(duì)于其中不適用的各項(xiàng)要求，應(yīng)當(dāng)說(shuō)明理由。

3.產(chǎn)品技術(shù)要求及檢驗(yàn)報(bào)告

3.1產(chǎn)品技術(shù)要求

申請(qǐng)人應(yīng)當(dāng)在原材料質(zhì)量和生產(chǎn)工藝穩(wěn)定的前提下，根據(jù)產(chǎn)品研制、前期評(píng)價(jià)等結(jié)果，依據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)及有關(guān)文獻(xiàn)資料，結(jié)合產(chǎn)品特性按照《醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫(xiě)指導(dǎo)原則》的要求編寫(xiě)產(chǎn)品技術(shù)要求。產(chǎn)品技術(shù)要求應(yīng)不低于YY/T 1194《α-淀粉酶測(cè)定試劑（盒）（連續(xù)監(jiān)測(cè)法）》，如適用，性能指標(biāo)也應(yīng)包含校準(zhǔn)品、質(zhì)控品的規(guī)定。如適用，產(chǎn)品技術(shù)要求亦建議參考如YY/T 1549《生化分析儀用校準(zhǔn)物》、YY/T 1662《生化分析儀用質(zhì)控物》等其他相關(guān)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的要求。

申報(bào)產(chǎn)品如有適用的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品發(fā)布，產(chǎn)品應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品檢驗(yàn)要求。

3.2產(chǎn)品檢驗(yàn)報(bào)告

應(yīng)提交按產(chǎn)品技術(shù)要求進(jìn)行檢驗(yàn)的檢驗(yàn)報(bào)告。在保證產(chǎn)品原材料和生產(chǎn)工藝穩(wěn)定可靠的基礎(chǔ)上，采用在符合醫(yī)療器械質(zhì)量管理體系相關(guān)要求的條件下生產(chǎn)的產(chǎn)品進(jìn)行檢驗(yàn)。報(bào)告形式可為申請(qǐng)人出具的自檢報(bào)告或委托有資質(zhì)的醫(yī)療器械檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)出具的檢驗(yàn)報(bào)告。申請(qǐng)人開(kāi)展自檢的，應(yīng)當(dāng)符合《醫(yī)療器械注冊(cè)自檢管理規(guī)定》及相關(guān)法規(guī)的要求。有適用的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)，應(yīng)當(dāng)使用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行檢驗(yàn)。

4.分析性能研究

申請(qǐng)人應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品特性按照《定量檢測(cè)體外診斷試劑分析性能評(píng)估注冊(cè)審查指導(dǎo)原則》要求提交詳細(xì)的分析性能評(píng)估資料。

分析性能評(píng)估的對(duì)象應(yīng)是由樣本處理用產(chǎn)品、檢測(cè)試劑、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品、檢測(cè)設(shè)備等構(gòu)成的檢測(cè)系統(tǒng)，檢測(cè)試劑應(yīng)是原材料和生產(chǎn)工藝經(jīng)過(guò)選擇和確定后，在符合質(zhì)量管理體系的生產(chǎn)環(huán)境下生產(chǎn)的產(chǎn)品。

如申報(bào)產(chǎn)品適用不同的機(jī)型，需要在不同機(jī)型上分別進(jìn)行分析性能評(píng)估。

如申報(bào)產(chǎn)品包含不同的包裝規(guī)格，需要對(duì)各包裝規(guī)格進(jìn)行分析或驗(yàn)證。

用于分析性能評(píng)估的樣本，應(yīng)盡量與預(yù)期適用的真實(shí)臨床樣本一致，并按照說(shuō)明書(shū)描述的方式進(jìn)行樣本采集、處理、運(yùn)輸和保存。

對(duì)于每項(xiàng)分析性能的研究都應(yīng)包括研究目的、研究方法、可接受標(biāo)準(zhǔn)、試驗(yàn)數(shù)據(jù)、統(tǒng)計(jì)方法等詳細(xì)資料。有關(guān)研究背景信息也應(yīng)在資料中有所體現(xiàn)，包括試驗(yàn)地點(diǎn)、日期、適用儀器、試劑以及校準(zhǔn)品和質(zhì)控品的規(guī)格和批號(hào)、試驗(yàn)樣本（需明確類(lèi)型、來(lái)源）等。分析性能評(píng)估的試--驗(yàn)方法可以參考相關(guān)國(guó)內(nèi)外有關(guān)體外診斷產(chǎn)品性能評(píng)估的指導(dǎo)原則進(jìn)行。

對(duì)于本試劑，建議對(duì)以下分析性能進(jìn)行研究：

4.1樣本穩(wěn)定性

樣本穩(wěn)定性一般包括樣本各種實(shí)際運(yùn)輸（如涉及）及儲(chǔ)存（常溫、冷藏和冷凍）條件下的保存期限驗(yàn)證，以確認(rèn)樣本的保存條件及保存時(shí)間。可以在合理的溫度范圍內(nèi)，每間隔一定的時(shí)間段即對(duì)儲(chǔ)存樣本進(jìn)行驗(yàn)證，從而確認(rèn)不同類(lèi)型樣本的穩(wěn)定性?？衫鋬霰４娴臉颖具€應(yīng)對(duì)凍融次數(shù)進(jìn)行合理驗(yàn)證。

4.2適用的樣本類(lèi)型

應(yīng)列明產(chǎn)品適用的樣本類(lèi)型，對(duì)適用的樣本類(lèi)型及添加劑（如抗凝劑、尿液添加劑等）進(jìn)行適用性確認(rèn)。對(duì)于不同的樣本類(lèi)型應(yīng)分別提交相應(yīng)的分析性能評(píng)估資料，如果選擇具有代表性的樣本類(lèi)型代替其他可比的樣本類(lèi)型進(jìn)行分析性能評(píng)估，應(yīng)說(shuō)明原因并提供證據(jù)支持。

4.3校準(zhǔn)品的量值溯源和質(zhì)控品的賦值

應(yīng)明確申報(bào)產(chǎn)品適用的校準(zhǔn)品和質(zhì)控品。如申報(bào)產(chǎn)品包括校準(zhǔn)品，應(yīng)提供量值溯源研究資料，如申報(bào)產(chǎn)品包括質(zhì)控品，應(yīng)提供賦值及其質(zhì)控范圍確定的研究資料（應(yīng)當(dāng)提交在所有適用機(jī)型上進(jìn)行賦值或驗(yàn)證的資料）。研究資料均應(yīng)符合相關(guān)注冊(cè)審查指導(dǎo)原則和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)（如《質(zhì)控品注冊(cè)審查指導(dǎo)原則-質(zhì)控品賦值研究》、YY/T 0638《體外診斷醫(yī)療器械 生物樣品中量的測(cè)量校準(zhǔn)品和質(zhì)控物質(zhì)中酶催化濃度賦值的計(jì)量學(xué)溯源性》等）。同時(shí)，至少應(yīng)對(duì)校準(zhǔn)品的正確度、質(zhì)控品的可接受區(qū)間/值以及校準(zhǔn)品/質(zhì)控品的均勻性進(jìn)行性能評(píng)估。如校準(zhǔn)品/質(zhì)控品的基質(zhì)不同于臨床常用樣本類(lèi)型，還應(yīng)提交基質(zhì)效應(yīng)研究資料。

4.4試劑空白

試劑空白是反應(yīng)試劑質(zhì)量的指標(biāo)之一。試劑空白包括試劑空白吸光度和試劑空白吸光度變化率。申請(qǐng)人應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品的具體情況選擇合適方法進(jìn)行試劑空白的研究，并確定合理的指標(biāo)要求。

4.5準(zhǔn)確度

準(zhǔn)確度是一個(gè)測(cè)得量值與被測(cè)量的真量值間的差異，這個(gè)測(cè)量誤差包括由測(cè)量偏倚估計(jì)的系統(tǒng)測(cè)量誤差分量和由標(biāo)準(zhǔn)差估計(jì)的隨機(jī)測(cè)量誤差分量，準(zhǔn)確度是正確度和精密度的組合。

4.5.1精密度

精密度指在規(guī)定條件下對(duì)同一或相似被測(cè)物對(duì)象重復(fù)測(cè)量所得量值間的一致程度。測(cè)量精密度是評(píng)價(jià)均勻樣本的一系列測(cè)量結(jié)果中隨機(jī)測(cè)量誤差的性能特征，通常由不精密度的量度以數(shù)字表達(dá)，如標(biāo)準(zhǔn)差、方差和變異系數(shù)。

影響精密度的條件包括：操作者、測(cè)量?jī)x器、測(cè)量程序、試劑批次（lot）、校準(zhǔn)（校準(zhǔn)品批次，校準(zhǔn)周期）、運(yùn)行（run）、時(shí)間、地點(diǎn)、環(huán)境條件（實(shí)驗(yàn)室溫度、濕度、空氣質(zhì)量、管理等）等。

應(yīng)根據(jù)各測(cè)量條件對(duì)檢測(cè)結(jié)果影響程度的分析，設(shè)計(jì)合理的精密度試驗(yàn)方案進(jìn)行評(píng)價(jià)，包括重復(fù)性、實(shí)驗(yàn)室內(nèi)精密度、實(shí)驗(yàn)室間精密度和批間（lot-to-lot）精密度。

用于評(píng)價(jià)精密度的樣本，其均勻性和穩(wěn)定性應(yīng)能滿足評(píng)價(jià)要求，并能反應(yīng)實(shí)際測(cè)試樣品的特征，一般為臨床實(shí)際檢測(cè)樣本或其混合物。樣本濃度一般包括測(cè)量區(qū)間高、中、低在內(nèi)的3～5個(gè)水平，應(yīng)有醫(yī)學(xué)決定水平或參考區(qū)間上/下限濃度附近的樣本，適用時(shí)可以采用添加高濃度物質(zhì)或稀釋臨床樣本來(lái)獲取高值或低值樣本。精密度研究可能涉及多天、多地點(diǎn)檢測(cè)，適用時(shí)可將樣本等分冷凍保存。

4.5.2正確度

正確度（trueness）指無(wú)窮多次重復(fù)測(cè)量所得量值的平均值與一個(gè)參考量值間的一致程度。測(cè)量正確度是評(píng)價(jià)均勻樣品的一系列測(cè)量結(jié)果中系統(tǒng)誤差的性能特征，通常用偏倚（bias）表示，一般在對(duì)測(cè)量系統(tǒng)進(jìn)行精密度評(píng)價(jià)且符合要求后才進(jìn)行?？蛇x擇下述方法進(jìn)行正確度評(píng)價(jià)。應(yīng)提供正確度評(píng)價(jià)用物質(zhì)或比較測(cè)量程序的基本信息和選擇依據(jù)。

4.5.2.1使用參考物質(zhì)的正確度評(píng)價(jià)

推薦的參考物質(zhì)包括：具有互換性的有證參考物質(zhì)或國(guó)家/國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品、參考品，參考測(cè)量程序/參考方法賦值的臨床樣本。不可采用產(chǎn)品校準(zhǔn)品、申報(bào)試劑檢測(cè)系統(tǒng)定值的質(zhì)控品進(jìn)行正確度評(píng)價(jià)。

建議采用2～3個(gè)水平的參考物質(zhì)（代表試劑測(cè)量區(qū)間內(nèi)的不同濃度，其中應(yīng)包括醫(yī)學(xué)決定水平或參考區(qū)間上/下限附近的濃度）進(jìn)行多次重復(fù)檢測(cè)，采用檢測(cè)結(jié)果平均值與參考量值計(jì)算偏倚。如參考物質(zhì)只有1個(gè)水平，且無(wú)合理稀釋方法，亦可在說(shuō)明原因的基礎(chǔ)上，僅采用1個(gè)水平的參考物質(zhì)進(jìn)行正確度評(píng)價(jià)。

4.5.2.2使用臨床樣本的正確度評(píng)價(jià)

可選擇參考測(cè)量程序或同類(lèi)已上市產(chǎn)品作為比較測(cè)量程序，采用申報(bào)產(chǎn)品與比較測(cè)量程序同時(shí)檢測(cè)臨床樣本，通過(guò)兩者的比對(duì)研究和偏倚估計(jì)，進(jìn)行申報(bào)試劑的正確度評(píng)價(jià)。

同類(lèi)已上市產(chǎn)品應(yīng)具有與申報(bào)產(chǎn)品相同的單位或能夠轉(zhuǎn)換成相同的單位。臨床樣本的濃度水平應(yīng)覆蓋申報(bào)產(chǎn)品的測(cè)量區(qū)間并盡量均勻分布。在性能建立時(shí)，建議對(duì)每個(gè)樣本重復(fù)檢測(cè)，以平均值或中位數(shù)進(jìn)行回歸分析，并評(píng)價(jià)醫(yī)學(xué)決定水平或參考區(qū)間上/下限濃度的偏倚。

4.6空白限、檢出限及定量限

檢測(cè)方法的下限是評(píng)價(jià)測(cè)量系統(tǒng)質(zhì)量的一個(gè)重要性能指標(biāo)，體現(xiàn)了測(cè)量系統(tǒng)的檢測(cè)能力。檢出限（LoD）和定量限（LoQ）是評(píng)估檢測(cè)方法下限的指標(biāo)，空白限（LoB）是建立和驗(yàn)證檢出限時(shí)的必要指標(biāo)。

申請(qǐng)人應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品的具體情況選擇合適方法進(jìn)行檢測(cè)能力的研究，空白限、檢出限和定量限的評(píng)價(jià)分為建立和驗(yàn)證。

4.6.1空白限、檢出限及定量限的建立

LoB，LoD，LoQ的建立需分別選擇多個(gè)獨(dú)立的樣本（空白樣本、低濃度水平樣本、已知濃度的低水平樣本），在多天內(nèi)進(jìn)行研究。

LoB一般由多個(gè)獨(dú)立空白樣本（無(wú)分析物）多天的檢測(cè)結(jié)果計(jì)算獲得；LoD一般由多個(gè)獨(dú)立低濃度（含有分析物）樣本多天的檢測(cè)結(jié)果結(jié)合LoB計(jì)算獲得。應(yīng)根據(jù)具體產(chǎn)品的原理、檢測(cè)結(jié)果差異和數(shù)據(jù)分布，選擇合理的試驗(yàn)方案和統(tǒng)計(jì)分析方法。

LoQ是在滿足預(yù)設(shè)的準(zhǔn)確度目標(biāo)前提下可測(cè)定的最低被測(cè)量。預(yù)設(shè)的準(zhǔn)確度目標(biāo)應(yīng)在臨床需求允許誤差下結(jié)合偏倚和精密度。最常見(jiàn)的是設(shè)定總誤差（TE）目標(biāo)值，計(jì)算多個(gè)獨(dú)立的預(yù)設(shè)LoQ目標(biāo)濃度樣本多天多批的重復(fù)測(cè)試結(jié)果，如果測(cè)試結(jié)果的TE滿足預(yù)先設(shè)定，則平均濃度報(bào)告為測(cè)量程序的LoQ。

LoD建立過(guò)程涉及多批多樣本多天的測(cè)定，應(yīng)保證樣本的穩(wěn)定性和一致性，多批建立結(jié)果選取低濃度樣本的最大值，濃度一般在1LoB-5 LoB之間。LoQ建立時(shí)的樣本應(yīng)有明確的標(biāo)準(zhǔn)值，可以采用參考物質(zhì)或通過(guò)參考測(cè)量程序或其他具有可接受準(zhǔn)確度的測(cè)量程序測(cè)定得到的具有標(biāo)準(zhǔn)值的低濃度樣本。如涉及將樣本稀釋至低濃度水平，應(yīng)確保稀釋液不引起明顯的基質(zhì)效應(yīng)，且在低濃度區(qū)間呈線性。

4.6.2空白限、檢出限及定量限的驗(yàn)證

LoB、LoD和LoQ的驗(yàn)證需各選擇至少2個(gè)樣本（空白樣本、檢出限濃度樣本、定量限濃度樣本），在多天內(nèi)進(jìn)行重復(fù)測(cè)試，每個(gè)試劑批次至少需要獲得20個(gè)檢測(cè)結(jié)果，計(jì)算符合要求的檢測(cè)結(jié)果比例，如果比例符合統(tǒng)計(jì)學(xué)要求/預(yù)設(shè)的臨界值，則4.6.1建立的LoB，LoD，得到驗(yàn)證。一般來(lái)講，LoB總是低于LoD，而LoD則低于或等于LoQ。

4.7分析特異性

分析特異性受干擾和交叉反應(yīng)的影響。申請(qǐng)人應(yīng)分析待測(cè)樣本中及試劑使用過(guò)程中潛在的干擾物質(zhì)和交叉反應(yīng)。

4.7.1干擾試驗(yàn)

應(yīng)評(píng)價(jià)樣本中常見(jiàn)的干擾物質(zhì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響，如甘油三酯、膽紅素、血紅蛋白等干擾因子。

進(jìn)行干擾物質(zhì)研究時(shí)，建議采用至少2個(gè)分析物水平的樣本，其濃度應(yīng)在醫(yī)學(xué)決定水平或參考區(qū)間上/下限附近。

4.8測(cè)量區(qū)間及可報(bào)告區(qū)間

線性區(qū)間、測(cè)量區(qū)間和可報(bào)告區(qū)間是定量體外診斷系統(tǒng)研發(fā)與評(píng)價(jià)的關(guān)鍵指標(biāo)。線性區(qū)間是在排除隨機(jī)誤差的情況下反映待評(píng)價(jià)被測(cè)量在樣本中稀釋能力的指標(biāo)，主要基于統(tǒng)計(jì)學(xué)計(jì)算。測(cè)量區(qū)間與可報(bào)告區(qū)間是基于待評(píng)價(jià)檢測(cè)系統(tǒng)要求的隨機(jī)誤差范圍內(nèi)且包含系統(tǒng)誤差的指標(biāo)。

4.8.1線性區(qū)間的建立與驗(yàn)證

建立線性區(qū)間所使用的樣本基質(zhì)應(yīng)與臨床樣本相似，但不可采用含有對(duì)測(cè)量方法具有明確干擾作用物質(zhì)的樣本。推薦使用濃度超過(guò)預(yù)期線性區(qū)間上限的高濃度樣本，以及接近或位于線性區(qū)間下限的低濃度樣本。

高濃度樣本可按優(yōu)先順序選擇以下來(lái)源：

可獲得的天然單人份臨床樣本；

可獲得的混合臨床樣本或在臨床樣本中添加分析物（加入量不超過(guò)總體積的1/10）；

商業(yè)質(zhì)控物或定標(biāo)物（樣本基質(zhì)應(yīng)與臨床樣本相似）。

低濃度樣本可選擇以下來(lái)源：

可獲得的天然單人份臨床樣本；

處理過(guò)的臨床樣本；

經(jīng)驗(yàn)證無(wú)基質(zhì)效應(yīng)的樣本稀釋液、商業(yè)質(zhì)控物或定標(biāo)物。

建立線性區(qū)間時(shí)，應(yīng)在預(yù)期測(cè)定區(qū)間內(nèi)選擇至少11個(gè)濃度水平，濃度水平應(yīng)可覆蓋整個(gè)預(yù)期線性區(qū)間（包含最大值和最小值），每個(gè)水平樣本重復(fù)測(cè)定，測(cè)定結(jié)果利用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法進(jìn)行線性判斷和不精密度判斷。

驗(yàn)證線性區(qū)間時(shí)，將接近線性區(qū)間上限的高值樣本與低值樣本按一定比例稀釋為至少5個(gè)濃度，濃度水平應(yīng)可覆蓋整個(gè)線性區(qū)間，每個(gè)水平樣本重復(fù)測(cè)定，測(cè)定結(jié)果利用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法進(jìn)行線性判斷，線性區(qū)間相關(guān)系數(shù)r＞0.990可初步判定建立的線性區(qū)間符合要求。

4.8.2測(cè)量區(qū)間的建立與驗(yàn)證

測(cè)量區(qū)間建立及驗(yàn)證所采用的數(shù)據(jù)為線性區(qū)間建立及驗(yàn)證的數(shù)據(jù)。即每一稀釋度下的相對(duì)偏倚或絕對(duì)偏倚不大于預(yù)設(shè)的目標(biāo)不確定度或允許誤差。如不符合，則適當(dāng)縮小測(cè)量區(qū)間或驗(yàn)證未通過(guò)。故測(cè)量區(qū)間下限為定量限，線性區(qū)間包含測(cè)量區(qū)間。

4.8.3可報(bào)告區(qū)間的建立與驗(yàn)證

建立可報(bào)告區(qū)間時(shí)，應(yīng)選擇接近測(cè)量區(qū)間上限的樣本（不少于3份）進(jìn)行不同比例的稀釋?zhuān)貜?fù)測(cè)定并計(jì)算不同稀釋比例下的還原濃度，還原濃度與理論濃度相對(duì)偏倚不大于設(shè)定偏倚的最大稀釋倍數(shù)為申報(bào)產(chǎn)品的最大可稀釋倍數(shù)。

驗(yàn)證可報(bào)告區(qū)間時(shí)，應(yīng)選擇接近測(cè)量區(qū)間上限的樣本，在最大可稀釋倍數(shù)及上下各一個(gè)稀釋度進(jìn)行樣本稀釋和重復(fù)測(cè)定，若測(cè)定結(jié)果相對(duì)偏倚不大于設(shè)定偏倚的稀釋度不小于聲稱(chēng)最大可稀釋倍數(shù)，即為驗(yàn)證通過(guò)。

4.9反應(yīng)體系

α-淀粉酶測(cè)定試劑注冊(cè)申報(bào)時(shí)無(wú)需提交反應(yīng)體系資料，由申請(qǐng)人保存，技術(shù)審評(píng)需要時(shí)應(yīng)提交。

5.穩(wěn)定性研究

試劑的穩(wěn)定性主要包括實(shí)時(shí)穩(wěn)定性研究，使用穩(wěn)定性研究和運(yùn)輸穩(wěn)定性研究。使用穩(wěn)定性研究包括試劑開(kāi)瓶穩(wěn)定性（如適用）、復(fù)溶穩(wěn)定性（如適用）、機(jī)載穩(wěn)定性（如適用）、校準(zhǔn)頻率或校準(zhǔn)穩(wěn)定性（如適用）等內(nèi)容。

申請(qǐng)人可根據(jù)實(shí)際需要選擇合理的穩(wěn)定性研究方案，應(yīng)提交研究方案、報(bào)告和數(shù)據(jù)。

試劑穩(wěn)定性研究應(yīng)提交至少三批產(chǎn)品在實(shí)際儲(chǔ)存條件下保存至成品有效期后的實(shí)時(shí)穩(wěn)定性研究資料，明確儲(chǔ)存的環(huán)境條件（如溫度、濕度和光照）及有效期。

使用穩(wěn)定性研究應(yīng)明確產(chǎn)品使用的溫度、濕度條件等。

運(yùn)輸穩(wěn)定性研究應(yīng)明確產(chǎn)品正確運(yùn)輸?shù)沫h(huán)境條件（如溫度、濕度、光照和機(jī)械保護(hù)等）。同時(shí)說(shuō)明產(chǎn)品的包裝方式以及暴露的最差運(yùn)輸條件。

6.參考區(qū)間研究

參考區(qū)間的研究資料應(yīng)符合《體外診斷試劑參考區(qū)間確定注冊(cè)審查指導(dǎo)原則》。應(yīng)當(dāng)詳細(xì)說(shuō)明參考區(qū)間確定的方法或依據(jù)，說(shuō)明確定參考區(qū)間所采用樣本的背景信息、類(lèi)型等內(nèi)容，并提供參考區(qū)間確定的詳細(xì)試驗(yàn)資料及分析總結(jié)。

尿液樣本與血液樣本應(yīng)分別進(jìn)行參考區(qū)間的研究。血清檢測(cè)結(jié)果參考區(qū)間可參考WS/T 404.8《臨床常用生化檢驗(yàn)項(xiàng)目參考區(qū)間 第8部分：血清淀粉酶》。

7.其他資料

主要原材料和生產(chǎn)工藝研究資料產(chǎn)品注冊(cè)申報(bào)時(shí)無(wú)需提交，由申請(qǐng)人保存，技術(shù)審評(píng)需要時(shí)應(yīng)提交。

應(yīng)提交三批產(chǎn)品的生產(chǎn)及自檢記錄。

證明產(chǎn)品安全性、有效性的其他非臨床研究資料。

（四）臨床資料資料

α-淀粉酶測(cè)定試劑已列入《免于臨床試驗(yàn)體外診斷試劑目錄》，根據(jù)體外診斷試劑臨床評(píng)價(jià)的相關(guān)要求，申請(qǐng)人可依據(jù)《免于臨床試驗(yàn)的體外診斷試劑臨床評(píng)價(jià)技術(shù)指導(dǎo)原則》提交臨床評(píng)價(jià)資料，也可依據(jù)《體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》的要求進(jìn)行臨床試驗(yàn)。

如申報(bào)產(chǎn)品與《免于臨床試驗(yàn)體外診斷試劑目錄》所述產(chǎn)品不具有等同性，則應(yīng)通過(guò)臨床試驗(yàn)的方式進(jìn)行產(chǎn)品的臨床評(píng)價(jià)，臨床試驗(yàn)方案的制定、試驗(yàn)的過(guò)程以及報(bào)告的撰寫(xiě)等均應(yīng)符合相關(guān)法規(guī)及《體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》的要求。

免于臨床試驗(yàn)的申報(bào)產(chǎn)品的臨床評(píng)價(jià)資料包括與《免于臨床試驗(yàn)體外診斷試劑目錄》對(duì)應(yīng)項(xiàng)目的對(duì)比資料、臨床評(píng)價(jià)報(bào)告（包括描述性比對(duì)分析和比對(duì)性能數(shù)據(jù)）等。比對(duì)性能數(shù)據(jù)部分中，試驗(yàn)持續(xù)時(shí)間、樣本背景信息、樣本數(shù)量和樣本濃度范圍等都應(yīng)符合《免于臨床試驗(yàn)的體外診斷試劑臨床評(píng)價(jià)技術(shù)指導(dǎo)原則》的要求。

（五）產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)和標(biāo)簽樣稿

說(shuō)明書(shū)承載了產(chǎn)品預(yù)期用途、檢驗(yàn)方法、檢驗(yàn)結(jié)果的解釋以及注意事項(xiàng)等重要信息，是指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)室工作人員正確操作、臨床醫(yī)生針對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果給出合理醫(yī)學(xué)解釋的重要依據(jù)。因此，產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)是體外診斷試劑注冊(cè)申報(bào)最重要的文件之一。產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的格式應(yīng)符合《醫(yī)療器械說(shuō)明書(shū)和標(biāo)簽管理規(guī)定》和《體外診斷試劑說(shuō)明書(shū)編寫(xiě)指導(dǎo)原則》的要求。產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的所有內(nèi)容均應(yīng)與申請(qǐng)人提交的注冊(cè)申報(bào)資料中的相關(guān)研究結(jié)果保持一致，如某些內(nèi)容引用自參考文獻(xiàn)，則應(yīng)以規(guī)范格式對(duì)此內(nèi)容進(jìn)行標(biāo)注，并單獨(dú)列明參考文獻(xiàn)的相關(guān)信息。產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)內(nèi)容原則上應(yīng)全部用中文進(jìn)行表述；如含有國(guó)際通用或行業(yè)內(nèi)普遍認(rèn)可的英文縮寫(xiě)，可用括號(hào)在中文后標(biāo)明；對(duì)于確實(shí)無(wú)適當(dāng)中文表述的詞語(yǔ)，可使用相應(yīng)英文或其縮寫(xiě)。

下面對(duì)α-淀粉酶測(cè)定試劑說(shuō)明書(shū)的重點(diǎn)內(nèi)容進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明，以指導(dǎo)注冊(cè)申報(bào)人員更合理地完成說(shuō)明書(shū)編制。

1.【產(chǎn)品名稱(chēng)】

產(chǎn)品名稱(chēng)中不應(yīng)當(dāng)出現(xiàn)樣本類(lèi)型、定性/定量等內(nèi)容。

英文（原文）名稱(chēng)僅為進(jìn)口體外診斷試劑適用。

2.【預(yù)期用途】

預(yù)期用途應(yīng)明確試劑用于體外定量檢測(cè)，明確適用樣本類(lèi)型及待測(cè)物，此外還應(yīng)包含α-淀粉酶的背景介紹、臨床背景情況及與臨床適應(yīng)證的關(guān)系。

3.【主要組成成分】

3.1應(yīng)說(shuō)明試劑組分的名稱(chēng)、數(shù)量、比例或濃度、生物學(xué)來(lái)源信息。多組分試劑盒應(yīng)明確說(shuō)明不同批號(hào)試劑盒中各組分是否可以互換。

3.2如有組合注冊(cè)的校準(zhǔn)品，校準(zhǔn)品應(yīng)注明量值及其溯源性；如有組合注冊(cè)的質(zhì)控品，質(zhì)控品應(yīng)注明靶值和靶值范圍，若校準(zhǔn)品或質(zhì)控品的值為批特異，可注明批特異，并附單獨(dú)的靶值。

3.3對(duì)于產(chǎn)品中不包含，但對(duì)該試驗(yàn)必需的試劑組分，說(shuō)明書(shū)中應(yīng)列出此類(lèi)試劑的名稱(chēng)、注冊(cè)/備案人、注冊(cè)/備案證號(hào)等相關(guān)信息。

3.4對(duì)于非試劑組分，如試驗(yàn)用耗材、賦值表（靶值單）、校準(zhǔn)卡等，應(yīng)注明相關(guān)信息。

4.【儲(chǔ)存條件及有效期】

應(yīng)對(duì)試劑的效期穩(wěn)定性、開(kāi)封穩(wěn)定性（如適用）、復(fù)溶穩(wěn)定性（如適用）等信息作詳細(xì)介紹，包括環(huán)境溫濕度、避光條件等。不同組分保存條件及有效期不同時(shí)，應(yīng)分別說(shuō)明。產(chǎn)品有效期以其中效期最短的為準(zhǔn)。明確“生產(chǎn)日期、使用期限或者失效日期見(jiàn)標(biāo)簽”。

5.【適用儀器】

應(yīng)明確具體適用儀器的型號(hào)及生產(chǎn)廠家，不能泛指某一系列儀器，且儀器型號(hào)應(yīng)與分析性能評(píng)估資料一致。

6.【樣本要求】

應(yīng)明確樣本適用類(lèi)型。

應(yīng)明確樣本的采集、處理方式，包括抗凝劑、抑菌劑的要求。

明確能夠保證樣本穩(wěn)定保存的條件。如需凍存，應(yīng)明確凍存條件和凍融次數(shù)。

7.【檢驗(yàn)方法】

應(yīng)包含反應(yīng)步驟和反應(yīng)體系相關(guān)內(nèi)容，如各反應(yīng)步驟所需試驗(yàn)條件，樣本和檢測(cè)過(guò)程中各組分的用量體積等。

應(yīng)包含校準(zhǔn)程序相關(guān)內(nèi)容，明確校準(zhǔn)周期。

應(yīng)包含質(zhì)量控制程序相關(guān)內(nèi)容，詳細(xì)描述質(zhì)控品的使用、質(zhì)量控制方法。

應(yīng)包含試驗(yàn)結(jié)果的計(jì)算或讀取相關(guān)內(nèi)容。

8.【參考區(qū)間】

應(yīng)明確參考區(qū)間，并簡(jiǎn)要說(shuō)明參考區(qū)間確定的基本信息，如樣本量、人群特征（如性別、年齡、種族等）和采用的統(tǒng)計(jì)學(xué)方法等。若不同樣本類(lèi)型的參考區(qū)間不同，應(yīng)分別列出。

9.【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】

 依據(jù)其臨床意義對(duì)可能出現(xiàn)的結(jié)果進(jìn)行合理的解釋 （如適用）。

說(shuō)明可能對(duì)試驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響的因素，明確有可能存在的數(shù)值升高因素及數(shù)值降低因素，明確說(shuō)明對(duì)何種條件下需要進(jìn)行確認(rèn)試驗(yàn)，以及在確認(rèn)試驗(yàn)時(shí)對(duì)待測(cè)樣本可能采取的優(yōu)化條件等進(jìn)行詳述。

若超過(guò)線性區(qū)間上限的高濃度樣本可稀釋后測(cè)定，則應(yīng)說(shuō)明樣本的最大可稀釋倍數(shù)、稀釋溶液等信息。

10.【檢驗(yàn)方法的局限性】

說(shuō)明該檢驗(yàn)方法由于哪些原因會(huì)使測(cè)量結(jié)果產(chǎn)生偏離，或測(cè)量結(jié)果還不能完全滿足臨床需要。應(yīng)明確干擾物對(duì)測(cè)定的影響，同時(shí)列出干擾物的具體濃度，不應(yīng)使用模糊的描述方式。

應(yīng)提示唾液對(duì)試劑有嚴(yán)重影響，需規(guī)范操作，避免唾液污染試劑。

11.【產(chǎn)品性能指標(biāo)】

此項(xiàng)內(nèi)容為分析性能研究資料和臨床評(píng)價(jià)資料的總結(jié)，應(yīng):

11.1概括描述每項(xiàng)分析性能研究如試劑空白（空白吸光度、空白吸光度變化率）、準(zhǔn)確度/正確度、精密度、靈敏度（分析靈敏度、空白限、檢出限、定量限）、測(cè)量區(qū)間及可報(bào)告區(qū)間、分析特異性、等適用項(xiàng)目的研究方法和結(jié)果。

11.2概括描述臨床評(píng)價(jià)包括免于臨床試驗(yàn)的臨床評(píng)價(jià)和臨床試驗(yàn)的方法和結(jié)果。

（六）質(zhì)量管理體系文件

應(yīng)按照《體外診斷試劑注冊(cè)申報(bào)資料要求及說(shuō)明》的要求提交質(zhì)量管理體系文件。

三、參考文獻(xiàn)

[1]中華人民共和國(guó)國(guó)務(wù)院.醫(yī)療器械監(jiān)督管理?xiàng)l例:中華人民共和國(guó)國(guó)務(wù)院令第739號(hào)[Z].

[2]國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局.體外診斷試劑注冊(cè)與備案管理辦法:國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局令第48號(hào)[Z].

[3]國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局.醫(yī)療器械說(shuō)明書(shū)和標(biāo)簽管理規(guī)定:國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局令第6號(hào)[Z].

[4]國(guó)家藥品監(jiān)督管理局.體外診斷試劑分類(lèi)規(guī)則:國(guó)家藥監(jiān)局公告2021年第129號(hào)[Z].

[5]國(guó)家藥品監(jiān)督管理局.免于臨床試驗(yàn)體外診斷試劑目錄:國(guó)家藥監(jiān)局通告2021年第70號(hào)[Z].

[6]國(guó)家藥品監(jiān)督管理局.免于臨床試驗(yàn)的體外診斷試劑臨床評(píng)價(jià)技術(shù)指導(dǎo)原則:國(guó)家藥監(jiān)局通告2021年第74號(hào)[Z].

[7]國(guó)家藥品監(jiān)督管理局.體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則:國(guó)家藥監(jiān)局通告2021年第72號(hào)[Z].

[8]國(guó)家藥品監(jiān)督管理局醫(yī)療器械技術(shù)審評(píng)中心.體外診斷試劑說(shuō)明書(shū)編寫(xiě)指導(dǎo)原則:國(guó)家藥監(jiān)局器審中心關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑主要原材料研究注冊(cè)審查指導(dǎo)原則等12項(xiàng)注冊(cè)審查指導(dǎo)原則通告2024年第1號(hào)[Z].

[9]YY/T 1194-2011,α-淀粉酶測(cè)定試劑（盒）（連續(xù)監(jiān)測(cè)法）[S].

附件

α-淀粉酶簡(jiǎn)介

α-淀粉酶(國(guó)際酶學(xué)分類(lèi)編號(hào)為Ec.3.2.1.1)是一種內(nèi)切酶，它能隨機(jī)水解淀粉分子內(nèi)部的α-1，4糖苷鍵，由于產(chǎn)物的末端殘基碳原子構(gòu)型為α構(gòu)型，故稱(chēng)α淀粉酶。α-淀粉酶不能水解淀粉分子內(nèi)的α-1，6糖苷鍵，但可以跨越此鍵水解分子內(nèi)部的α-1，4糖苷鍵,然后使淀粉生成麥芽糖、葡萄糖、異麥芽糖。

淀粉酶是人類(lèi)史上發(fā)現(xiàn)的第一個(gè)酶，其測(cè)定方法有很多，粘度法、濁度法、糖化法，淀粉——碘量法、限定底物檢測(cè)法等。由于臨床測(cè)定用試劑對(duì)靈敏度、準(zhǔn)確度和重復(fù)性的要求較高，粘度法、濁度法、糖化法等方法已基本淘汰。碘量法中半定量的溫氏法也已淘汰，碘淀粉比色法還在部分臨床機(jī)構(gòu)使用。由于天然淀粉存在結(jié)構(gòu)不確定，難以標(biāo)準(zhǔn)化，反應(yīng)不成零級(jí)反應(yīng)等缺點(diǎn)，目前主流方法已由非限定底物轉(zhuǎn)向限定底物轉(zhuǎn)變。

限定底物分為兩大類(lèi)。一類(lèi)是以用亞乙基封閉麥芽寡糖苷非還原端的底物，如EPS底物法。

另一類(lèi)是，用氯封閉麥芽糖末端而保護(hù)不受外切酶（β-淀粉酶）作用，麥芽糖苷直接連接顯色底物。如CNPG3底物法。

除此之外，淀粉酶測(cè)定試劑還有采用干化學(xué)法，即在聚酯基材上涂覆多層分析成分，將一滴患者樣本滴在干片上，并通過(guò)擴(kuò)散層均勻地分布到試劑層。擴(kuò)散層含有反應(yīng)所需的已染色淀粉底物（染劑共價(jià)結(jié)合到支鏈淀粉）。樣本中的淀粉酶催化該已染色淀粉的水解反應(yīng)，生成更小的染色糖類(lèi)。然后，這些染色糖類(lèi)分散到試劑下層。分別在一定時(shí)間，通過(guò)反射光光度法測(cè)定試劑層中已染色糖類(lèi)的反射強(qiáng)度。幾次干片反射強(qiáng)度讀數(shù)的差與樣本中的淀粉酶活性成正比。

α-淀粉酶檢測(cè)是臨床實(shí)驗(yàn)室最常用的檢測(cè)項(xiàng)目之一，臨床應(yīng)用時(shí)間較長(zhǎng)，臨床意義也比較明確，主要用于胰腺疾病的輔助診斷。