附件：α-羥丁酸脫氫酶測定試劑注冊審查指導(dǎo)原則（2024年第19號）.doc

α-羥丁酸脫氫酶測定試劑注冊審查指導(dǎo)原則

本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊申請人對α-羥丁酸脫氫酶測定試劑注冊申報資料的準(zhǔn)備及撰寫，同時也為技術(shù)審評部門審評注冊申報資料提供參考。

本指導(dǎo)原則是對α-羥丁酸脫氫酶測定試劑的一般要求，申請人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對注冊申報資料的內(nèi)容進(jìn)行充實(shí)和細(xì)化。

本指導(dǎo)原則是供注冊申請人和技術(shù)審評人員使用的指導(dǎo)性文件，但不包括審評審批所涉及的行政事項，亦不作為法規(guī)強(qiáng)制執(zhí)行，應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。如果有能夠滿足相關(guān)法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但是需要提供詳細(xì)的研究資料和驗(yàn)證資料。

本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定的，隨著法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系的不斷完善和科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時進(jìn)行調(diào)整。

一、適用范圍

α-羥丁酸脫氫酶測定試劑是指用于定量檢測人體樣本（血清、血漿）中α-羥丁酸脫氫酶活性的試劑。

本指導(dǎo)原則適用于以α-酮丁酸為底物，以酶促反應(yīng)動力學(xué)為檢驗(yàn)原理，采用全自動、半自動生化分析儀或分光光度計，進(jìn)行α-羥丁酸脫氫酶（α-Hydroxybutyrate Dehydrogenase,α-HBDH）定量檢測的臨床化學(xué)體外診斷試劑。不包括用于單獨(dú)申報的校準(zhǔn)品和質(zhì)控品。其他方法學(xué)的α-羥丁酸脫氫酶測定試劑注冊可參考本指導(dǎo)原則，但應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，如不適用，應(yīng)另行選擇適用自身方法學(xué)特性的研究步驟及方法。

二、注冊審查要點(diǎn)

注冊申報資料的撰寫應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊申報資料要求及說明》的相關(guān)要求。

（一）監(jiān)管信息

1.產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品名稱應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊與備案管理辦法》及相關(guān)法規(guī)的要求，如α-羥丁酸脫氫酶測定試劑盒（α-酮丁酸底物法）。

產(chǎn)品名稱一般由三部分組成。第一部分：被測物名稱為α-羥丁酸脫氫酶；第二部分：用途，如檢測試劑；第三部分：方法或者原理，如α-酮丁酸底物法等。

2.分類依據(jù)

根據(jù)《體外診斷試劑分類子目錄》，α-羥丁酸脫氫酶測定試劑產(chǎn)品類別為：II-4用于酶類檢測的試劑，管理類別為第二類，分類編碼為6840。

3.其他信息還包括產(chǎn)品列表、關(guān)聯(lián)文件、申報前與監(jiān)管機(jī)構(gòu)的聯(lián)系情況和溝通記錄以及符合性聲明等文件。

（二）綜述資料

應(yīng)按《體外診斷試劑注冊申報資料要求及說明》的要求提交概述、產(chǎn)品描述、預(yù)期用途、申報產(chǎn)品上市歷史等資料。其中，需注意以下內(nèi)容：

1.概述

應(yīng)描述α-羥丁酸脫氫酶測定試劑名稱及其確定依據(jù)；該產(chǎn)品屬于II-4用于酶類檢測的試劑，管理類別為第二類，分類編碼為6840；描述申報產(chǎn)品預(yù)期用途；描述有關(guān)申報產(chǎn)品的背景信息概述或特別細(xì)節(jié)（如適用），如申報產(chǎn)品的歷史概述、歷次提交的信息，與其他經(jīng)批準(zhǔn)上市產(chǎn)品的關(guān)系等。

2.產(chǎn)品描述

2.1產(chǎn)品綜述

應(yīng)明確產(chǎn)品所采用的技術(shù)原理，產(chǎn)品組成，原材料的來源及制備方法，主要生產(chǎn)工藝，檢驗(yàn)方法，質(zhì)控品的制備方法及賦值情況，校準(zhǔn)品的制備方法及溯源情況等。技術(shù)原理包括反應(yīng)原理，方法學(xué)，測量方法，信號處理方法，數(shù)據(jù)獲取和解讀方式，分析前處理步驟等。

描述產(chǎn)品主要研究結(jié)果的總結(jié)和評價，包括分析性能評估、參考區(qū)間、穩(wěn)定性以及臨床評價等。

描述不同包裝規(guī)格之間的差異。

描述產(chǎn)品中使用的生物材料或衍生物(如適用)，包括生物學(xué)來源（如人、動物、病原體、重組或發(fā)酵產(chǎn)物）和組織來源（如血液）的描述。人源性材料須對有關(guān)傳染?。℉IV、HBV、HCV等）病原體檢測予以說明；其他動物源及微生物來源的材料，應(yīng)當(dāng)說明其在產(chǎn)品運(yùn)輸、使用過程中對使用者和環(huán)境是安全的，并提供相關(guān)的證明文件。

2.2包裝描述

提供有關(guān)產(chǎn)品包裝信息，包括包裝形狀和材料等。

2.3研發(fā)歷程

闡述申請注冊產(chǎn)品的研發(fā)背景和目的。如有參考的同類產(chǎn)品或前代產(chǎn)品，應(yīng)當(dāng)提供同類產(chǎn)品和/或前代產(chǎn)品的信息，并說明選擇其作為研發(fā)參考的原因。

2.4與同類和/或前代產(chǎn)品的比較

應(yīng)著重從預(yù)期用途、主要組成成分、技術(shù)原理、溯源情況、主要性能指標(biāo)、參考區(qū)間、臨床應(yīng)用情況等方面寫明擬申報產(chǎn)品與境內(nèi)、外已上市同類產(chǎn)品和/或前代產(chǎn)品之間的主要區(qū)別。

3.預(yù)期用途

3.1預(yù)期用途

說明產(chǎn)品用于體外定量檢測人體樣本中α-羥丁酸脫氫酶的活性，應(yīng)明確具體的樣本類型如血清、血漿等，適用的樣本類型應(yīng)結(jié)合實(shí)際的分析性能研究及臨床研究情況進(jìn)行確認(rèn)。

3.2 臨床適應(yīng)證

臨床適應(yīng)證的發(fā)生率、易感人群、分析物的詳細(xì)介紹及與臨床適應(yīng)證的關(guān)系，相關(guān)的臨床或?qū)嶒?yàn)室診斷方法。

如：α-HBDH是乳酸脫氫酶同工酶（LDH）的一種，主要代表LDH1和LDH2的活性，在心臟分布較多。血清α-HBDH升高常見于心臟疾病心肌梗死、心肌炎等；溶血性貧血時血清α-HBDH增高；血清α-HBDH/LDH比值可用于心臟疾病和肝臟疾病的鑒別診斷。

α-羥丁酸脫氫酶測定目前廣泛應(yīng)用的方法為α-酮丁酸底物法。

3.3適用人群

適用人群：目標(biāo)患者/人群的信息，對于適用人群包含兒童或新生兒的情況，應(yīng)進(jìn)行明確。

3.4預(yù)期使用者

使用者為經(jīng)過專業(yè)培訓(xùn)的醫(yī)務(wù)人員或?qū)嶒?yàn)室專業(yè)技術(shù)人員。

3.5預(yù)期使用環(huán)境

預(yù)期使用地點(diǎn)為醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室或醫(yī)院、醫(yī)療/臨床實(shí)驗(yàn)室，其檢測過程中的環(huán)境條件應(yīng)符合適用儀器正常工作環(huán)境條件，并且試劑儲存需滿足說明書規(guī)定的儲存條件及有效期。

（三）非臨床資料

1.產(chǎn)品風(fēng)險管理資料

申請人應(yīng)考慮產(chǎn)品全生命周期中的各個環(huán)節(jié)，從預(yù)期用途、可能的使用錯誤、與安全性有關(guān)的特征、已知及可預(yù)見的危害等方面進(jìn)行風(fēng)險分析、風(fēng)險評價和風(fēng)險控制，綜合評價產(chǎn)品風(fēng)險可接受程度，形成風(fēng)險管理資料。

申請人應(yīng)同時識別出α-羥丁酸脫氫酶測定試劑的特定風(fēng)險，如：抗凝劑（草酸鹽、枸櫞酸鈉、氟化鈉等）、防腐劑（如硼酸等）可能對檢測結(jié)果產(chǎn)生干擾；紅細(xì)胞中α-HBDH含量高，若樣本為溶血血清或分離不及時，會對檢測結(jié)果產(chǎn)生干擾等。

2.體外診斷試劑安全和性能基本原則清單

產(chǎn)品應(yīng)符合《體外診斷試劑安全和性能基本原則清單》各項適用要求所采用的方法，以及證明其符合性的文件。對于其中不適用的各項要求，應(yīng)當(dāng)說明理由。

對于包含在產(chǎn)品注冊申報資料中的文件，應(yīng)當(dāng)說明其在申報資料中的具體位置；對于未包含在產(chǎn)品注冊申報資料中的文件，應(yīng)當(dāng)注明該證據(jù)文件名稱及其在質(zhì)量管理體系文件中的編號以備查。

3.產(chǎn)品技術(shù)要求及檢驗(yàn)報告

3.1產(chǎn)品技術(shù)要求

申請人應(yīng)當(dāng)在原材料質(zhì)量和生產(chǎn)工藝穩(wěn)定的前提下，根據(jù)產(chǎn)品研制、前期臨床評價等結(jié)果，依據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)，行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(如YY/T 1242《α-羥丁酸脫氫酶檢測試劑（盒）》)及有關(guān)文獻(xiàn)，按照《醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則》的有關(guān)要求進(jìn)行產(chǎn)品技術(shù)要求編寫。主要包括以下性能指標(biāo)：外觀、裝量、準(zhǔn)確度/正確度、線性、精密度、試劑空白、分析靈敏度等。如有組合注冊的校準(zhǔn)品，校準(zhǔn)品主要包括以下性能指標(biāo)：外觀、裝量、水分含量（干粉適用）、均勻性等。如有組合注冊的質(zhì)控品，質(zhì)控品主要包括以下性能指標(biāo)：外觀、裝量、可接受區(qū)間/值、均勻性等。具體產(chǎn)品的性能指標(biāo)需結(jié)合方法學(xué)本身特性，確定其性能指標(biāo)或者提供此指標(biāo)不適用的說明。

產(chǎn)品的檢驗(yàn)方法需根據(jù)技術(shù)性能指標(biāo)設(shè)定，檢驗(yàn)方法需優(yōu)先采用公認(rèn)的或已頒布的標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法；自建檢驗(yàn)方法應(yīng)進(jìn)行方法學(xué)研究，以確保檢驗(yàn)方法的科學(xué)性、準(zhǔn)確性、可重現(xiàn)性和可操作性。

3.2產(chǎn)品檢驗(yàn)報告

在保證產(chǎn)品原材料和生產(chǎn)工藝穩(wěn)定可靠的基礎(chǔ)上，采用在符合醫(yī)療器械質(zhì)量管理體系相關(guān)要求的條件下生產(chǎn)的產(chǎn)品進(jìn)行檢驗(yàn)。有適用的國家標(biāo)準(zhǔn)品的，應(yīng)當(dāng)使用國家標(biāo)準(zhǔn)品對產(chǎn)品進(jìn)行檢驗(yàn)?？商峤灰韵氯我恍问降臋z驗(yàn)報告：

3.2.1申請人出具的自檢報告。

3.2.2委托有資質(zhì)的醫(yī)療器械檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)出具的檢驗(yàn)報告。

如產(chǎn)品提交自檢報告，還需按照《醫(yī)療器械注冊自檢管理規(guī)定》的要求提交相應(yīng)資料。

4.分析性能研究

申請人應(yīng)提交在有效質(zhì)量管理體系下生產(chǎn)的體外診斷試劑產(chǎn)品的所有分析性能評估資料，對于每項分析性能的研究都應(yīng)包括研究目的、試驗(yàn)設(shè)計、研究方法、可接受標(biāo)準(zhǔn)、試驗(yàn)數(shù)據(jù)、統(tǒng)計方法等詳細(xì)資料。分析性能研究的試驗(yàn)方法，可以參考《定量檢測體外診斷試劑分析性能評估注冊審查指導(dǎo)原則》。

分析性能評估時應(yīng)將試劑、儀器和所選用的校準(zhǔn)品、質(zhì)控品作為一個整體進(jìn)行評價，評估整個系統(tǒng)的性能是否符合要求。有關(guān)分析性能評估的背景信息也應(yīng)在申報資料中有所體現(xiàn)，包括試驗(yàn)時間、地點(diǎn)、檢驗(yàn)人員、適用儀器、試劑規(guī)格和批號、所選用的校準(zhǔn)品和質(zhì)控品、試驗(yàn)用樣本類型及定值方法等。用于分析性能評估的樣本，應(yīng)盡量與預(yù)期適用的真實(shí)臨床樣本一致，并按照說明書描述的方式進(jìn)行樣本采集、處理、運(yùn)輸和保存。

如申報產(chǎn)品適用不同的機(jī)型，需要提交在不同機(jī)型上進(jìn)行評估的資料。如試劑包含不同包裝規(guī)格，需對各包裝規(guī)格間的差異進(jìn)行分析或驗(yàn)證。如不同規(guī)格間存在性能差異，需采用每個包裝規(guī)格產(chǎn)品進(jìn)行分析性能評估；如不同規(guī)格間不存在性能差異，需要詳細(xì)說明各規(guī)格間的差別及可能產(chǎn)生的影響，采用具有代表性的包裝規(guī)格進(jìn)行分析性能評估。

4.1樣本穩(wěn)定性

為防止溶血，血液樣本采集后應(yīng)及時分離血清或血漿，血漿樣本應(yīng)使用抗凝劑抗凝。

應(yīng)充分考慮實(shí)際使用過程中樣本采集、處理、運(yùn)輸及保存等各個階段的條件，對不同類型樣本的穩(wěn)定性分別進(jìn)行評價并提交研究資料。對于冷凍保存的樣本還應(yīng)對凍融次數(shù)進(jìn)行評價。內(nèi)容包括建議的保存條件、添加劑（如抗凝劑）和運(yùn)輸條件（如涉及）等。樣本穩(wěn)定性內(nèi)容的研究結(jié)果應(yīng)在說明書【樣本要求】中進(jìn)行詳細(xì)描述。

4.2適用的樣本類型

血清、血漿是α-羥丁酸脫氫酶檢測的適宜樣本，如果試劑適用于多種樣本類型，應(yīng)采用合理方法評價每種樣本類型的適用性。

其中，針對血清、血漿樣本，可選擇具有統(tǒng)計學(xué)意義數(shù)量的樣本進(jìn)行樣本一致性的同源比對研究。對于不具有可比性的樣本類型，應(yīng)對每種樣本類型分別進(jìn)行分析性能評估。采用抗凝劑時，應(yīng)說明抗凝劑對樣本檢測結(jié)果的影響。樣本量選擇應(yīng)體現(xiàn)一定的統(tǒng)計學(xué)意義，說明樣本的來源及制備方法。

4.3校準(zhǔn)品的量值溯源和質(zhì)控品的賦值（如適用）

目前α-羥丁酸脫氫酶暫無有證參考物質(zhì)及參考方法，α-羥丁酸脫氫酶校準(zhǔn)品一般溯源至制造商選定測量程序。制造商選定測量程序應(yīng)選取已上市的成熟檢測系統(tǒng)，溯源明確，未發(fā)生過不良反應(yīng)事件，且與待評價試劑的檢測結(jié)果具有相同的活性單位。

如申報產(chǎn)品包括校準(zhǔn)品，應(yīng)當(dāng)提交溯源資料。如申報產(chǎn)品包括質(zhì)控品，應(yīng)當(dāng)提交在所有適用機(jī)型上進(jìn)行賦值和驗(yàn)證的資料。

4.4正確度

對測量正確度的評價，可采用參考物質(zhì)測定或方法學(xué)比對，申請人可根據(jù)實(shí)際情況選擇合理方法進(jìn)行研究。目前α-羥丁酸脫氫酶暫無有證參考物質(zhì)及參考方法，建議申請人采用方法學(xué)比對進(jìn)行正確度研究。如有有證參考物質(zhì)及參考方法發(fā)布，優(yōu)先采用參考物質(zhì)測定進(jìn)行研究。

4.4.1方法學(xué)比對

采用參考測量程序或國內(nèi)普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的已上市同類試劑作為參比方法，與擬申報試劑同時測定一批臨床樣本，臨床樣本的濃度水平應(yīng)覆蓋申報試劑的測量區(qū)間并均勻分布。比較兩種方法之間的偏倚，如果偏倚在申請人給定的允許誤差范圍內(nèi)，說明兩種測定系統(tǒng)對樣本的測定結(jié)果基本相符。擬申報試劑與比對試劑相比，對同一份臨床樣本的醫(yī)學(xué)解釋不會產(chǎn)生差異結(jié)果。

在實(shí)施方法學(xué)比對前，應(yīng)分別對擬申報試劑和比對試劑進(jìn)行初步評估，只有在確認(rèn)兩者都分別符合各自相關(guān)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)后方可進(jìn)行比對試驗(yàn)。方法學(xué)比對時應(yīng)注意適用機(jī)型、質(zhì)量控制、樣本類型、濃度分布范圍并對結(jié)果進(jìn)行合理的統(tǒng)計學(xué)分析。

如條件允許，建議與具有相同溯源性的分析系統(tǒng)作比對。

4.4.2參考物質(zhì)測定

參考物質(zhì)包括具有互換性的有證參考物質(zhì)、公認(rèn)的參考品、標(biāo)準(zhǔn)品，參考測量程序賦值的臨床樣本等。不可采用產(chǎn)品校準(zhǔn)品、申報試劑檢測系統(tǒng)定值的質(zhì)控品進(jìn)行正確度評價。

采用至少兩個濃度的參考物質(zhì)，代表臨床意義相關(guān)的高、低濃度水平，進(jìn)行多次重復(fù)測定，根據(jù)測定結(jié)果平均值與參考量值計算偏倚。如參考物質(zhì)只有一個水平，且無合理稀釋方法，亦可在說明原因的基礎(chǔ)上，僅采用一個水平的參考物質(zhì)進(jìn)行正確度評價，結(jié)果應(yīng)在申請人給定范圍內(nèi)。

4.5精密度

應(yīng)根據(jù)各測量條件對檢測結(jié)果影響程度的分析，設(shè)計合理的精密度試驗(yàn)方案進(jìn)行評價，包括重復(fù)性、中間精密度和再現(xiàn)性。

精密度研究用樣本一般為臨床實(shí)際檢測樣本或其混合物。樣本濃度一般包括測量區(qū)間高、中、低在內(nèi)的3～5個水平，應(yīng)有醫(yī)學(xué)決定水平或參考區(qū)間上/下限濃度附近的樣本。精密度研究可能涉及多天、多地點(diǎn)檢測，應(yīng)確保樣本的穩(wěn)定性和一致性，可將樣本等分保存。

4.6空白限（LoB）、檢出限（LoD）和定量限（LoQ）

4.6.1空白限、檢出限與定量限的建立

空白限（LoB），檢出限(LoD)，定量限(LoQ)的建立需分別選擇多個獨(dú)立的樣本（空白樣本、低濃度水平樣本、已知濃度的低水平樣本），在多天內(nèi)進(jìn)行研究。

空白限一般由多個獨(dú)立的空白樣本（無分析物）的測定結(jié)果，經(jīng)計算獲得；檢出限一般由多個低濃度（含有分析物）樣本的測定結(jié)果結(jié)合空白限（或單獨(dú)計算）獲得。定量限應(yīng)滿足預(yù)設(shè)正確度指標(biāo)，即考慮偏倚和精密度的要求。

4.6.2空白限、檢出限與定量限的驗(yàn)證

空白限、檢出限及定量限的驗(yàn)證，每個項目需選擇至少2個樣本（空白樣本、檢出限濃度樣本、定量限濃度樣本），在多天內(nèi)進(jìn)行試驗(yàn)。每個試劑批次至少需要獲得20個檢測結(jié)果，計算與4.6.1 研究獲得的空白限、檢出限及定量限呈現(xiàn)一致性的檢測結(jié)果比例，如果比例符合統(tǒng)計學(xué)要求/預(yù)設(shè)的臨界值，則空白限、檢出限及定量限得到驗(yàn)證。

4.7分析特異性

4.7.1干擾試驗(yàn)

干擾物質(zhì)研究應(yīng)當(dāng)考慮常見的內(nèi)源性干擾、外源性干擾和已有報道的干擾物質(zhì)等對產(chǎn)品檢測結(jié)果的影響。常見的內(nèi)源性干擾物質(zhì)包括膽紅素、血紅蛋白、甘油三酯等，常見的外源性干擾物質(zhì)包括樣本添加劑（如防腐劑）、常用藥物及其代謝物（如維生素C）、患者群體使用的藥物及其代謝物、膳食物質(zhì)、樣本收集或處理過程中接觸到的物質(zhì)，樣本污染物；亦應(yīng)考慮文獻(xiàn)中已報道的對類似試劑或測量程序存在干擾的物質(zhì)。申請人應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品特點(diǎn)選擇潛在的干擾物質(zhì)進(jìn)行驗(yàn)證。

研究的干擾物濃度應(yīng)覆蓋臨床樣本中的最高濃度（最差情形），并對干擾的程度進(jìn)行量化。將研究結(jié)果在說明書中進(jìn)行描述，明確干擾物質(zhì)影響的最大濃度。待評價的樣本濃度建議采用至少2個分析物水平的樣本，其濃度應(yīng)在醫(yī)學(xué)決定水平或參考區(qū)間上/下限附近。

4.7.2交叉反應(yīng)

交叉反應(yīng)研究需對可能的交叉反應(yīng)物質(zhì)進(jìn)行檢測，對檢測結(jié)果設(shè)定合理的接受范圍，如果超出接受范圍，可認(rèn)為該物質(zhì)產(chǎn)生交叉反應(yīng)，應(yīng)評估該物質(zhì)濃度與交叉程度之間的關(guān)系。如檢測結(jié)果在接受范圍內(nèi)，可認(rèn)為該濃度的物質(zhì)不產(chǎn)生交叉反應(yīng)，應(yīng)明確不產(chǎn)生交叉反應(yīng)的物質(zhì)濃度上限。

建議選擇高濃度的交叉反應(yīng)物質(zhì)進(jìn)行驗(yàn)證，應(yīng)提供用于交叉反應(yīng)驗(yàn)證物質(zhì)的來源、制備、濃度等基本信息。

4.8測量區(qū)間及可報告區(qū)間

4.8.1線性區(qū)間

線性區(qū)間的研究所用的樣本基質(zhì)應(yīng)盡可能與臨床實(shí)際檢測的樣本相似，需采用高值和零濃度/低值樣本配制一系列不同濃度的樣本。當(dāng)建立試劑的線性區(qū)間時，需配制較預(yù)期線性區(qū)間更寬的至少9個不同濃度的樣本（不包括零濃度樣本），每個樣本進(jìn)行多次重復(fù)檢測，根據(jù)可接受線性偏差和各濃度的重復(fù)性，確定檢測次數(shù)。采用重復(fù)檢測均值和預(yù)期值進(jìn)行直線回歸分析，建議采用加權(quán)最小二乘回歸等分析方法，提供散點(diǎn)圖、線性回歸方程、線性相關(guān)系數(shù)（r）及線性偏差，判斷結(jié)果是否滿足可接受標(biāo)準(zhǔn)。

當(dāng)驗(yàn)證試劑的線性區(qū)間時，需配制覆蓋整個線性區(qū)間的至少5個不同濃度的樣本，每個樣本至少重復(fù)檢測2次。

測量區(qū)間，也稱分析測量區(qū)間，在該區(qū)間內(nèi)，臨床樣本在未經(jīng)稀釋、濃縮，或非常規(guī)測量程序步驟中的其他前處理情況下，檢測結(jié)果的線性偏差、不精密度和偏倚均在可接受范圍內(nèi)。測量區(qū)間下限為定量限，線性區(qū)間包含測量區(qū)間。

4.8.2可報告區(qū)間

如對超出測量區(qū)間濃度的樣本可進(jìn)行稀釋后檢測，應(yīng)研究合適的稀釋液和稀釋倍數(shù)，從而確定試劑的可報告區(qū)間?？蓤蟾鎱^(qū)間下限為檢出限，上限為測量區(qū)間上限╳稀釋倍數(shù)。

4.9試劑空白

4.9.1試劑空白吸光度

用生理鹽水測試試劑（盒），在37℃、340nm 波長、1cm光徑條件下，記錄測試啟動時的吸光度（A1）和約5 分鐘（t）后的吸光度（A2），A2測試結(jié)果即為試劑空白吸光度測定值。

4.9.2試劑空白吸光度變化率

記錄測試啟動時的吸光度（A1）和n分鐘(t)后的吸光度（A2），計算出每分鐘吸光度變化值 (|A2-A1|/t )，即為試劑空白吸光度變化率（ΔA/min）。

4.10分析靈敏度

用已知活性的樣品測試試劑（盒），記錄試劑（盒）在37℃、340nm波長、1cm光徑條件下的吸光度變化率。按照申請人規(guī)定的分析靈敏度計算公式計算分析靈敏度。

5.穩(wěn)定性研究

一般應(yīng)包含研究方案、報告和數(shù)據(jù)三部分內(nèi)容。

5.1實(shí)時穩(wěn)定性

提交至少三批申報產(chǎn)品在實(shí)際儲存條件下保存至成品有效期后的實(shí)時穩(wěn)定性研究資料。明確儲存的環(huán)境條件（如溫度、濕度和光照）及有效期。

5.2使用穩(wěn)定性

提交申報產(chǎn)品實(shí)際使用期間穩(wěn)定性的研究資料，應(yīng)包括所有組成成分的開瓶穩(wěn)定性。適用時提交復(fù)溶穩(wěn)定性、機(jī)載穩(wěn)定性及凍融次數(shù)研究資料等。機(jī)載穩(wěn)定性應(yīng)選擇所有機(jī)型進(jìn)行真實(shí)機(jī)載研究，如不同機(jī)型間試劑倉設(shè)計、進(jìn)樣模式、溫濕度范圍等無差異，也可選擇代表性機(jī)型研究。如產(chǎn)品中包含校準(zhǔn)品，還應(yīng)提交校準(zhǔn)頻率或校準(zhǔn)穩(wěn)定性研究資料。明確產(chǎn)品使用的溫度、濕度條件等。

5.3運(yùn)輸穩(wěn)定性

提交申報產(chǎn)品可在特定或者預(yù)期的條件下運(yùn)輸?shù)难芯抠Y料，應(yīng)說明產(chǎn)品正確運(yùn)輸?shù)沫h(huán)境條件（如溫度、濕度、光照和機(jī)械保護(hù)等）。同時說明產(chǎn)品的包裝方式以及暴露的最差運(yùn)輸條件。運(yùn)輸穩(wěn)定性研究可結(jié)合于實(shí)時穩(wěn)定性研究中。試劑的穩(wěn)定性研究應(yīng)注意選取代表性包裝規(guī)格進(jìn)行研究。

試劑穩(wěn)定性內(nèi)容的研究結(jié)果應(yīng)在說明書【儲存條件及有效期】中進(jìn)行詳細(xì)描述。

6.參考區(qū)間

申報產(chǎn)品可以建立自己的參考區(qū)間或驗(yàn)證參考區(qū)間，但都要確保參考區(qū)間的可溯源性，記錄確定參考區(qū)間的所有步驟，包括參考個體的選擇、分析前因素、樣本檢測以及統(tǒng)計分析方法等。

如參考已發(fā)布實(shí)施的臨床檢測參考區(qū)間標(biāo)準(zhǔn)等驗(yàn)證參考區(qū)間，應(yīng)依據(jù)《體外診斷試劑參考區(qū)間確定注冊審查指導(dǎo)原則》中“（二）參考區(qū)間的驗(yàn)證”章節(jié)相關(guān)條件進(jìn)行驗(yàn)證，如驗(yàn)證通過，可直接采用經(jīng)驗(yàn)證的參考區(qū)間；如驗(yàn)證不通過，應(yīng)建立參考區(qū)間。

參考區(qū)間的建立應(yīng)參考《體外診斷試劑參考區(qū)間確定注冊審查指導(dǎo)原則》中“（一）參考區(qū)間的建立”章節(jié)相關(guān)要求，提交建立參考區(qū)間所采用樣本來源及詳細(xì)的試驗(yàn)資料。研究樣本來源應(yīng)覆蓋年齡、性別等因素，盡可能考慮樣本來源的多樣性、代表性。應(yīng)明確參考人群的篩選標(biāo)準(zhǔn)，研究例數(shù)通常應(yīng)不低于120例。（注：研究例數(shù)不低于120例是為了保證能正確估計參考限的90%置信區(qū)間。申請人應(yīng)根據(jù)預(yù)設(shè)的置信水平進(jìn)行樣本研究例數(shù)的選擇并符合統(tǒng)計學(xué)要求。）α-羥丁酸脫氫酶不同年齡階段（嬰兒、兒童及成人）參考區(qū)間有差異，申請人可根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行分組研究，例數(shù)應(yīng)符合統(tǒng)計學(xué)要求。

7.其他資料

7.1三批產(chǎn)品的生產(chǎn)及自檢記錄。

7.2證明產(chǎn)品安全性、有效性的其他非臨床研究資料。

（四）臨床評價資料

根據(jù)體外診斷試劑臨床評價的相關(guān)要求，該項目已列入《免于臨床試驗(yàn)體外診斷試劑目錄》，申請人可按照《免于臨床試驗(yàn)的體外診斷試劑臨床評價技術(shù)指導(dǎo)原則》要求進(jìn)行臨床評價。

申請人也可通過臨床試驗(yàn)的方式進(jìn)行臨床評價；如申請人無法按要求進(jìn)行臨床評價或預(yù)期用途超出豁免目錄中的描述，應(yīng)進(jìn)行臨床試驗(yàn)；臨床試驗(yàn)的倫理、方案的制定以及報告的撰寫等臨床試驗(yàn)資料均應(yīng)符合《體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》對臨床試驗(yàn)資料的規(guī)定，相關(guān)資料簽章應(yīng)符合《醫(yī)療器械臨床試驗(yàn)質(zhì)量管理規(guī)范》的要求。

（五）產(chǎn)品說明書和標(biāo)簽樣稿

產(chǎn)品說明書和標(biāo)簽的格式應(yīng)符合《醫(yī)療器械說明書和標(biāo)簽管理規(guī)定》和《體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則》的要求。產(chǎn)品說明書的所有內(nèi)容均應(yīng)與申請人提交的注冊申報資料中的相關(guān)研究結(jié)果保持一致，如某些內(nèi)容引用自參考文獻(xiàn)，則應(yīng)以規(guī)范格式對此內(nèi)容進(jìn)行標(biāo)注，并單獨(dú)列明參考文獻(xiàn)的相關(guān)信息。

境外試劑應(yīng)當(dāng)提交產(chǎn)品原文說明書，中文說明書除格式要求外，其內(nèi)容應(yīng)盡量保持與原文說明書的一致性，翻譯力求準(zhǔn)確且符合中文表達(dá)習(xí)慣。

以下內(nèi)容僅對α-羥丁酸脫氫酶測定試劑說明書的重點(diǎn)內(nèi)容進(jìn)行詳細(xì)說明，說明書其他內(nèi)容應(yīng)根據(jù)《體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則》要求進(jìn)行編寫。

1.【產(chǎn)品名稱】

通用名稱，試劑名稱由三部分組成：被測物名稱、用途、方法或原理。例如：α-羥丁酸脫氫酶測定試劑盒（α-酮丁酸底物法）。

2.【包裝規(guī)格】

注明可測試的樣本數(shù)或裝量，如××測試/盒、××人份/盒、××mL，除國際通用計量單位外，其余內(nèi)容均應(yīng)采用中文進(jìn)行表述。如有貨號，可增加貨號信息。

2.1包裝規(guī)格應(yīng)明確裝量（如××mL；××人份）；

2.2帶有校準(zhǔn)品或質(zhì)控品應(yīng)明確標(biāo)識；

2.3與產(chǎn)品技術(shù)要求中所列的包裝規(guī)格一致；

2.4如不同包裝規(guī)格有與之特定對應(yīng)的機(jī)型，應(yīng)同時明確適用機(jī)型。

3.【預(yù)期用途】

首段內(nèi)容說明試劑用于體外定量檢測人樣本（血清或血漿）中α-羥丁酸脫氫酶的活性。第二段應(yīng)詳細(xì)說明預(yù)期用途。包括適用人群，相關(guān)的臨床適應(yīng)證和檢測目的等，如臨床上主要用于心肌梗死的輔助診斷。

其余段落對被測分析物進(jìn)行背景介紹、說明相關(guān)的臨床或?qū)嶒?yàn)室診斷方法；說明與預(yù)期用途相關(guān)的臨床背景情況；說明被測分析物與臨床適應(yīng)證的關(guān)系。

如：α-HBDH是乳酸脫氫酶同工酶（LDH）的一種，主要代表LDH1和LDH2的活性，在心臟分布較多。血清α-HBDH升高常見于心臟疾病心肌梗死、心肌炎等；溶血性貧血時血清α-HBDH增高；血清α-HBDH/LDH比值可用于心臟疾病和肝臟疾病的鑒別診斷。α-羥丁酸脫氫酶測定目前廣泛應(yīng)用的方法為α-酮丁酸底物法。

4.【檢驗(yàn)原理】

根據(jù)產(chǎn)品采用的方法學(xué)說明檢驗(yàn)的原理，檢測原理的描述應(yīng)結(jié)合產(chǎn)品主要組成成分、被測物和產(chǎn)物的關(guān)系進(jìn)行描述，必要時可結(jié)合圖示方法描述。

如：樣本中α-羥丁酸脫氫酶催化α-酮丁酸還原為α-羥丁酸，同時還原型NADH被氧化為氧化型NAD+；在特定波長下，NADH的消耗速率與血清α-HBDH濃度成正比，從而計算出α-HBDH的含量。

反應(yīng)式如下：

5.【主要組成成分】

應(yīng)明確以下內(nèi)容：

5.1說明試劑盒包含組分的名稱、數(shù)量、裝量。說明各組分中的核心反應(yīng)成分（如α-酮丁酸，還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH））、基質(zhì)（如磷酸鹽緩沖液）、防腐劑等。必要時，明確組分在基質(zhì)中的濃度、比例等信息。對于多組分產(chǎn)品，說明不同批號試劑盒中各組分是否可以互換。

5.2產(chǎn)品如包含校準(zhǔn)品、質(zhì)控品，說明濃度水平、核心反應(yīng)成分及其生物學(xué)來源，明確基質(zhì)、防腐劑等。此外，校準(zhǔn)品應(yīng)明確定值及其溯源性，質(zhì)控品應(yīng)注明靶值和靶值范圍，若校準(zhǔn)品或質(zhì)控品的值為批特異，可注明批特異，并附單獨(dú)的靶值。

5.3試劑盒中不包含但對該項檢測必需的組分，應(yīng)列明試劑的名稱、注冊人（備案人）。如該試劑已取得注冊證號/備案號，需注明“注冊證編號（備案編號）及貨號”；如該試劑正處于注冊/備案階段，需注明“貨號及注冊證編號:（留空）/備案編號:（留空）”。

6.【儲存條件及有效期】

首段明確貨架保存條件和有效期，如2~8℃保存，有效期12個月。同時明確特殊保存條件，如禁止冷凍、光線和濕度要求等。

其他段落描述以下內(nèi)容：

明確各組分的使用穩(wěn)定性，包括開封保存條件和保存時長、凍融次數(shù)、機(jī)載穩(wěn)定性等。

明確生產(chǎn)日期、使用期限/失效日期/有效期至見標(biāo)簽。

若各組分的保存條件不一致，應(yīng)分別描述。

若各組分的有效期不同，則試劑盒的有效期為最短保存時間。

保存溫度不應(yīng)有模糊表述，如“常溫”“室溫”，應(yīng)直接以℃為單位。

7.【適用儀器】

明確所適用的儀器類型，應(yīng)細(xì)化到具體廠家、型號。如需要可提供與儀器有關(guān)的信息以便指導(dǎo)用戶操作。如適用儀器為非通用的儀器則需寫明其具體型號，避免“系列”。

8.【樣本要求】

重點(diǎn)明確以下內(nèi)容：

8.1樣本的類型：明確適用的樣本類型，如有抗凝血應(yīng)明確抗凝劑。

8.2樣本的穩(wěn)定性：明確樣本采集后和處理后的保存條件和期限等。冷藏/冷凍樣本檢測前是否需恢復(fù)至室溫、凍融次數(shù)的要求。以上內(nèi)容應(yīng)與樣本穩(wěn)定性的研究結(jié)果一致。

9.【檢驗(yàn)方法】

應(yīng)詳細(xì)說明試驗(yàn)操作的各個步驟，包括：  

9.1樣本的處理：詳細(xì)描述樣本的處理方式和步驟，需要稀釋的樣本應(yīng)明確稀釋液種類及稀釋比例。

9.2試劑配制：各試劑組分的稀釋、混合及其他必要的程序等。

9.3反應(yīng)步驟、反應(yīng)體系和參數(shù)設(shè)置：詳細(xì)描述反應(yīng)步驟和各反應(yīng)步驟所需試驗(yàn)條件，如pH值、時間、溫度、波長等。明確樣本和檢測過程中各組分的用量體積。

9.4校準(zhǔn)程序：校準(zhǔn)品的使用方法、注意事項、校準(zhǔn)曲線的繪制。校準(zhǔn)有效期及需要重新校準(zhǔn)的情況。推薦的校準(zhǔn)周期。

9.5質(zhì)量控制程序：質(zhì)控品的使用方法、對質(zhì)控結(jié)果的必要解釋以及推薦的質(zhì)控周期等。

9.6試驗(yàn)結(jié)果的計算或讀取，包括對每個系數(shù)及對每個計算步驟的解釋（如適用）。如果可能，應(yīng)舉例說明。

10.【參考區(qū)間】

明確參考區(qū)間，并簡要說明參考區(qū)間的確定方法。應(yīng)包含參考區(qū)間確定的基本信息，包括：樣本量、參考人群特征（如性別、年齡、種族等）和采用的統(tǒng)計學(xué)方法。

建議注明以下字樣“由于地理、人種、性別等差異，建議各實(shí)驗(yàn)室建立自己的參考區(qū)間”。

11.【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】

11.1應(yīng)根據(jù)其臨床意義對可能出現(xiàn)的結(jié)果進(jìn)行合理的解釋。

11.2說明在何種情況下應(yīng)對樣本進(jìn)行重復(fù)測試，以及在重復(fù)測試時需要采取的樣本處理方式。

11.3若超過線性區(qū)間上限的高濃度樣本可稀釋后檢測，則應(yīng)說明樣本的最大可稀釋倍數(shù)、稀釋溶液等信息。

12.【檢驗(yàn)方法的局限性】

綜合產(chǎn)品的預(yù)期用途、臨床背景、檢測方法等信息，對可能出現(xiàn)的局限性進(jìn)行相關(guān)說明，申請人選擇適用的條款在產(chǎn)品說明書中予以闡述。

12.1明確常見干擾物質(zhì)對檢測結(jié)果的影響，企業(yè)可根據(jù)自身情況對特殊干擾物進(jìn)行說明，并注明可接受的最高限值，不應(yīng)使用模糊的描述方式。

12.2分析異常值出現(xiàn)的可能因素，明確說明何種情況下需要進(jìn)行確認(rèn)試驗(yàn)，詳述在確認(rèn)試驗(yàn)時對待測樣本可能采取的優(yōu)化條件等。

13.【產(chǎn)品性能指標(biāo)】

此項內(nèi)容為分析性能研究資料和臨床評價資料的總結(jié)，應(yīng):

13.1概括描述每項分析性能研究如準(zhǔn)確度/正確度、精密度、靈敏度、測量區(qū)間及可報告區(qū)間、分析特異性等適用項目的研究方法和結(jié)果。

13.2概括描述臨床評價包括免于臨床試驗(yàn)的臨床評價和臨床試驗(yàn)的方法和結(jié)果。

14.【注意事項】

建議包括以下內(nèi)容：

14.1產(chǎn)品僅用于體外診斷。檢測結(jié)果僅供臨床參考，對患者的臨床診治應(yīng)結(jié)合其癥狀/體征、病史、其他實(shí)驗(yàn)室檢查及治療反應(yīng)等情況綜合考慮。

14.2如無確切的證據(jù)證明其安全性，對所有樣本和反應(yīng)廢棄物都應(yīng)視為傳染源對待，提示操作者采取必要的防護(hù)措施。若試劑組分中，如質(zhì)控品、校準(zhǔn)品等含有人源物質(zhì)的組分，這些組分亦應(yīng)該被視為傳染源對待；對于動物源性組分，應(yīng)給出具有潛在感染性的警告。

14.3采用不同方法學(xué)的試劑檢測所得結(jié)果不應(yīng)直接相互比較，以免造成錯誤的醫(yī)學(xué)解釋；建議實(shí)驗(yàn)室在發(fā)給臨床醫(yī)生的檢測報告注明所用試劑特征。

14.4其他需要說明的注意事項。

（六）質(zhì)量管理體系文件

申請人應(yīng)當(dāng)在申請注冊時提交與產(chǎn)品研制、生產(chǎn)有關(guān)的質(zhì)量管理體系相關(guān)資料，主要包括綜述、生產(chǎn)制造信息、質(zhì)量管理體系程序、管理職責(zé)程序、資源管理程序、產(chǎn)品實(shí)現(xiàn)程序、質(zhì)量管理體系的測量、分析和改進(jìn)程序、其他質(zhì)量體系程序信息、質(zhì)量管理體系核查文件等內(nèi)容。

三、參考文獻(xiàn)

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[14]國家藥品監(jiān)督管理局醫(yī)療器械審評中心.體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則:國家藥監(jiān)局器審中心關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑主要原材料研究注冊審查指導(dǎo)原則等12項注冊審查指導(dǎo)原則的通告2024年第1號[Z].

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[16]GB/T 26124-2011,臨床化學(xué)體外診斷試劑盒[S].

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